[发明专利]一种人类表皮生长因子受体-2浓度的检测方法

摘要

本发明公开了一种人类表皮生长因子受体‑2浓度的检测方法，包括以下步骤：将金电极打磨、清洗、干燥；将金电极插入多肽溶液中自组装，巯基己醇封闭；取不同浓度HER‑2分别滴加至上述金电极表面进行反应，然后与适配体反应；将钼酸盐滴加在金电极表面反应得多根待测金电极；用方波伏安法分别对金电极进行测定，得多条方波伏安曲线，将各曲线中的峰电流与对应的HER‑2浓度做标准曲线；取待测HER‑2滴加至组装有多肽的金电极表面反应，再与适配体反应，将钼酸盐滴加在金电极表面，用方波伏安法测定得方波伏安曲线，将峰电流与标准曲线对照，测得HER‑2的浓度。该检测方法方便快捷、选择性好、灵敏度高、检测范围宽。

主权项

1.一种人类表皮生长因子受体‑2浓度的检测方法，包括以下步骤：(1)将金电极进行打磨、清洗、干燥后得到经过预处理的金电极；(2)将经过预处理的金电极插入能与人类表皮生长因子受体‑2进行特异性识别的多肽溶液中进行自组装，自组装完成后进行冲洗，然后用巯基己醇封闭，再次进行冲洗，得到组装有多肽的金电极；(3)取不同浓度的人类表皮生长因子受体‑2分别滴加至多根步骤(2)所得组装有多肽的金电极表面进行反应，反应完后进行冲洗，然后与能和人类表皮生长因子受体‑2进行特异性识别的适配体反应，反应完后冲洗掉未反应的适配体，得到多根修饰后的金电极；(4)将钼酸盐溶液滴加在步骤(3)所得修饰后的金电极表面进行反应生成磷钼酸盐沉淀，得到多根待测金电极；(5)用方波伏安法分别对步骤(4)所得多根待测金电极进行测定，得到多条方波伏安曲线，然后将各方波伏安曲线中的峰电流与对应的人类表皮生长因子受体‑2浓度做标准曲线；(6)取未知浓度的待测人类表皮生长因子受体‑2滴加至步骤(2)所得组装有多肽的金电极表面进行反应，反应完后进行冲洗，然后与能和人类表皮生长因子受体‑2进行特异性识别的适配体反应，反应完后冲洗掉未反应的适配体，得到未知浓度人类表皮生长因子受体‑2修饰后的金电极；(7)将钼酸盐溶液滴加在未知浓度人类表皮生长因子受体‑2修饰后的金电极表面进行反应生成磷钼酸盐沉淀，得到未知浓度人类表皮生长因子受体‑2待测金电极；(8)用方波伏安法对步骤(7)所得未知浓度人类表皮生长因子受体‑2待测金电极进行测定，得到方波伏安曲线，然后将该方波伏安曲线中的峰电流与步骤(5)所得标准曲线进行对照，即测得步骤(6)所述未知浓度的待测人类表皮生长因子受体‑2的浓度；所述步骤(2)中，所述能与人类表皮生长因子受体‑2进行特异性识别的多肽序列为CKLRLEWNR；所述步骤(3)和步骤(6)中，所述适配体序列为GCAGCGGTGTGGGG。