[发明专利]从大鲵皮或黏液中提取玻尿酸的方法有效
申请号: | 201610667457.7 | 申请日: | 2016-08-15 |
公开(公告)号: | CN106279465B | 公开(公告)日: | 2019-02-12 |
发明(设计)人: | 李伟;佟长青 | 申请(专利权)人: | 张家界(中国)金驰大鲵生物科技有限公司 |
主分类号: | C08B37/08 | 分类号: | C08B37/08 |
代理公司: | 大连非凡专利事务所 21220 | 代理人: | 闪红霞 |
地址: | 427400 *** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | 本发明公开一种从大鲵皮或黏液中提取玻尿酸的方法,其特征在于依次按照如下步骤进行:将大鲵皮或/和大鲵黏液在0~10℃进行匀浆;向匀浆中加入5~10倍体积pH 7~8的0.01~0.1M磷酸缓冲液及与匀浆质量比为0.1~1%的复合酶,酶解12~48 h;所述复合酶为3500 u/mg的链霉蛋白酶、6000u/mg的木瓜蛋白酶和6000 u/mg的胰蛋白酶按活力单位比为1:5:5比例混合;将酶解后的酶解液pH调为4~5,静置12h,6000rpm离心20 min,收集上清液;将上清液通过截留分子量为50000 Da的超滤膜进行分离,取超滤膜截留的液体;按体积比1:1.5~3比例加质量浓度95%乙醇,收集沉淀,冷冻干燥,得到玻尿酸。 | ||
搜索关键词: | 玻尿酸 大鲵 匀浆 超滤膜 复合酶 上清液 酶解 胰蛋白酶 截留分子量 链霉蛋白酶 磷酸缓冲液 木瓜蛋白酶 大鲵黏液 活力单位 酶解液 体积比 质量比 乙醇 沉淀 截留 | ||
【主权项】:
1.一种从大鲵皮或黏液中提取玻尿酸的方法,其特征在于依次按照如下步骤进行:a. 将大鲵皮或大鲵黏液在0~10℃进行匀浆;b. 向匀浆中加入5~10倍体积pH 7~8的0.01~0.1M磷酸缓冲液及与匀浆质量比为0.1~1%的复合酶,酶解12~48 h;所述复合酶为3500 u/mg的链霉蛋白酶、6000u/mg的木瓜蛋白酶和6000 u/mg的胰蛋白酶按活力单位比为1:5:5比例混合;将酶解后的酶解液pH调为4~5,静置12h,6000rpm离心20 min,收集上清液;c. 将上清液通过截留分子量为50000 Da的超滤膜进行分离,取超滤膜截留的液体;按体积比1:1.5~3比例加质量浓度95%乙醇,收集沉淀,冷冻干燥,得到玻尿酸。
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