[发明专利]一种大花栀子花苞的组织培养方法

摘要

本发明提供一种大花栀子花苞的组织培养方法，以大花栀子幼嫩花苞为外植体，进行愈伤组织诱导；将愈伤组织接种于不定芽诱导培养基，诱导不定芽再生；将不定芽转入增殖培养基，以获得丛生芽；将不定芽接种于生根培养基，以诱导生根，获得完整植株。传统的栀子繁殖方式，品种变异率高，繁殖周期长，不能满足市场需求。根据这种实际，我们选择耕作广谱、抗病性强的优良大花栀子品种为材料，利用植物的无性繁殖技术，获得优质的栀子种苗，以满足市场的需求。

主权项

一种大花栀子花苞的组织培养方法，其特征在于：所述方法包括如下：1）以大花栀子幼嫩花苞为外植体，进行愈伤组织诱导；2）将愈伤组织接种于不定芽诱导培养基，诱导不定芽再生；3）将不定芽转入增殖培养基，以获得丛生芽；4）将不定芽接种于生根培养基，以诱导生根，获得完整植株；步骤1）具体为：取距基部2cm、无病虫害的幼嫩花苞，用毛刷蘸洗衣粉液轻轻刷洗花苞，然后于流水下冲洗干净，置于超净工作台上，用75%的酒精消毒30s，用无菌水冲洗一次，再用0.1%的升汞加1‑2滴吐温‑20消毒8 min，用无菌水冲洗5‑6次，置于无菌滤纸上吸干水分，然后切成5 mm × 5 mm，接种于愈伤诱导培养基；所述的花苞愈伤诱导培养基为：MS+0.2~0.5mg/L 6‑BA+0.001~0.003 mg/L TDZ+25~30g/L蔗糖+6~7g/L琼脂，pH 6.0~6.2；步骤2）所述的不定芽诱导培养基为：MS+0.5~2.0 mg/LIBA+0.001~0.002mg/L TDZ+25~30 g/L蔗糖+6~7g/L琼脂，pH 6.0~6.2；步骤3）所述的增殖培养基为：MS+0.1~0.5 mg/L NAA+1.0~2.0 mg/L 6‑BA+25~30 g/L蔗糖+6~7g/L琼脂，pH 6.0~6.2；步骤4）所述的生根培养基为：1/2MS+0.5~1.0 mg/L IBA+20~25 g/L蔗糖+6~7g/L琼脂，pH 6.0~6.2。