[发明专利]诱导的T7 RNA聚合酶

摘要

本发明涉及一种诱导的T7 RNA聚合酶，尤其是光或小分子化合物诱导调控的T7 RNA聚合酶；具体是选择T7 RNA聚合酶中特定的氨基酸序列位置作为拆分位点拆分，并将拆分后的片段与光敏感或小分子化合物敏感的结构域、蛋白或肽融合，实现了以下诱导调控：a.光或小分子化合物介导的蛋白‑蛋白相互作用调控T7 RNA聚合酶活性；b.光诱导别构调控使拆分片段自组装恢复T7 RNA聚合酶活性；c.光敏结构域嵌入T7 RNA聚合酶内部通过光诱导别构调控聚合酶活性。本发明构建的诱导体系实现了在时间和空间维度上对基因表达的精确调控，以及T7 RNA聚合酶拆分体系的多样化为实现模块化调控基因表达提供了强大的参考价值。

主权项

1.一种T7 RNA聚合酶的诱导表达调控试剂盒，所述试剂盒包含：拆分为两部分的T7 RNA聚合酶，其中拆分的两部分分别与经外源诱导会相互作用的一对蛋白或肽中的每个融合表达，或拆分的两部分中的一部分与经外源诱导会别构的蛋白或肽融合表达，或其中插入外源蛋白或肽的T7 RNA聚合酶，或其编码基因，或包含所述编码基因的构建体，其中，所述拆分或插入的氨基酸位置选自氨基酸位置165‑168、308‑312、343‑371、496‑500、560‑568、588‑611、661‑668或709‑724；所述经外源诱导会相互作用的一对蛋白或肽是VVD，所述VVD的编码序列为SEQ ID NO：1，或者所述经外源诱导会相互作用的一对蛋白或肽是FKBP12和FRB，所述FKBP12和FRB的编码序列分别为SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4；所述经外源诱导会别构的蛋白或肽和所述外源蛋白或肽是pMag，所述pMag的编码序列是SEQ ID NO：2。