[发明专利]一种他克莫司制剂的有关物质检测方法

摘要

本发明提供一种他克莫司制剂的有关物质检测方法，该方法是采用高效液相色谱法进行的，包括下述步骤：（1）配制他克莫司样品溶液；和（2）将步骤（1）所得样品溶液注入高效液相色谱仪，采用流动相进行等度洗脱，并记录色谱图；其中，所述高效液相色谱法的色谱柱固定相填充剂为羟丙基硅烷键合硅胶，三根串联；流动相的配制为正己烷的体积：正丁基氯的体积：乙腈的体积=7：2：1。本发明的检测方法在同一液相条件下测定他克莫司制剂中的有关物质，所述检测方法操作简便、分离度高、测定方法专属性强、检测结果准确可信。

主权项

一种他克莫司制剂中的有关物质的检测方法，其中所述他克莫司制剂中的有关物质包括有关物质Ⅷ、有关物质Ⅸ、有关物质ⅩⅤ、有关物质Ⅺ、未知物A、异构体Ⅱ、异构体Ⅰ、有关物质Ⅵ，该方法是采用高效液相色谱法进行的，其特征在于，包括下述步骤：（1）配制他克莫司样品溶液；（2）将步骤（1）所得样品溶液注入高效液相色谱仪，流动相作为等度洗脱，并记录色谱图；其中，所述供试品溶液室温制备方法包括下述步骤：取本品1.0g，精密称定，置一带有封盖的离心管中，向离心管中加入正己烷‑乙酸乙酯混合溶液5ml，剧烈振摇直至混悬完全；以3000转/分钟的速率离心5分钟；将上清液小心转移至一预处理过的固相萃取柱中，转移时注意不要使沉淀悬浮；向离心管中再加入正己烷‑乙酸乙酯混合溶液5ml，剧烈振摇直至沉淀再形成混悬液；再以3000转/分钟的速率离心5分钟；将上清液转移至上述同一固相萃取柱中，转移时注意不要使沉淀悬浮，弃去沉淀；用正己烷‑乙酸乙酯混合溶液洗涤固相萃取柱6次，每次5ml并保证每次冲洗液冲洗完全后再进行下一次冲洗；使软膏基质充分被除去；然后将该固相萃取柱置一50ml梨形瓶顶端，精密加入乙酸乙酯5ml，待洗脱完后，再精密加入乙腈5ml洗脱，收集洗脱液；将梨形瓶置40℃以下水浴真空旋转蒸发至油状残留物；精密加入正己烷‑正丁基氯‑乙腈混合溶液1ml，涡旋使残余物溶解至他克莫司浓度为1mg/ml，作为供试品溶液；所述高效液相色谱法的色谱柱固定相填充剂为羟丙基硅烷键合硅胶，三根串联；流动相的配制为正己烷的体积：正丁基氯的体积：乙腈的体积=7：2：1。