[发明专利]一种降低鸡蛋胆固醇含量的疫苗及制备方法及应用

摘要

本发明公开了一种降低鸡蛋胆固醇含量的疫苗及制备方法及其应用，通过基因工程技术在体外大量表达鸡载脂蛋白apo VLDL‑II重组蛋白，将纯化的apo VLDL‑II抗原与适宜佐剂制备成疫苗；将制备的疫苗免疫产蛋鸡，显著地降低了鸡蛋中胆固醇的含量。本发明建立的方法，是一种新的安全、成本低且高效的降低产蛋鸡鸡蛋胆固醇含量的疫苗制备方法，所制备的apo VLDL‑II疫苗可降低鸡蛋中40%~60%的胆固醇含量。

主权项

1.一种降低鸡蛋胆固醇含量的疫苗，其特征在于：所述疫苗是由apo VLDL–II重组蛋白和免疫佐剂组成，所述apo VLDL–II重组蛋白的编码核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；/n所述apo VLDL–II重组蛋白与免疫佐剂按照体积比为1：1进行乳化而成,apo VLDL–II重组蛋白中蛋白量为100～1000ug；制备方法，包括以下步骤：/n(1)引物设计：设计apo VLDL–II基因表达的引物；/n(2)RNA的抽提与转录：从母鸡肝脏中提取RNA，经逆转录合成cDNA；/n(3)荧光定量realtime PCR扩增反应：以cDNA为模板通过PCR扩增获得apo VLDL-II全长；/n(4)免疫原的制备：构建pET32a-apo VLDL-II重组质粒，转化BL21功能菌，表达出apoVLDL-II重组蛋白；/n(5)疫苗的制备：将纯化的apo VLDL-II重组抗原分别加入完全弗氏佐剂混合，即成。/n