[发明专利]一种用于肿瘤辅助治疗的细胞制剂

摘要

本发明公开一种用于肿瘤辅助治疗的细胞制剂，主要含有DC细胞、CIK细胞、NK细胞、CTL细胞、质量浓度为1.2‑1.5％的人血白蛋白、胸腺五肽与生理盐水；其中，上述细胞总数量为1.5×108‑3×108个/ml；本发明提供细胞制剂中复合DC细胞、CIK细胞、NK细胞与CTL细胞，多种细胞相互作用，该细胞制剂用于肿瘤辅助治疗，可使治疗后患者的生活质量明显提高，患者的生存期也大大延伸；细胞制剂中含有人血白蛋白、胸腺五肽与生理盐水，可以保护细胞，通过维持渗透压，确保细胞的活性。

主权项

一种用于肿瘤辅助治疗的细胞制剂，其特征在于，该细胞制剂含有DC细胞、CIK细胞、NK细胞、CTL细胞、质量浓度为1.2‑1.5％的人血白蛋白、胸腺五肽与生理盐水；其中，上述细胞总数量为1.5×10⁸‑3×10⁸个/ml；该细胞制剂由下述步骤制得：1)制备DC细胞：用含有rhGM‑CSF和rhIL‑4的RPMI‑1640培养液培养分离的外周血单个核细胞，收集非贴壁细胞，并加入γ‑干扰素培养，然后移入经CD3McAb包被过的培养瓶中，加入rhIL‑2继续培养两周，收集细胞；2)制备NK细胞：取步骤1)中收集到的非贴壁细胞，接种于培养瓶内使用GT‑T561培养基重悬细胞，向培养瓶的培养液中添加rhIL‑2和自体血浆上清，置于37℃，5％CO₂培养箱中培养两周，收集细胞；3)制备CIK细胞：取步骤1)收集的悬浮液，分别加入AIM‑V无血清培养基20ml，将悬浮的初始T细胞移入，置于37℃，5％CO₂细胞培养箱中培养，次日，补充50％的培养基，将每瓶CIK细胞的一半量移出，作为CTL培养，剩余半量继续培养两周，收集细胞；4)制备CTL细胞：向步骤3)移出的一半量CIK细胞，加入DC疫苗，使CIK和DC比例控制为4：1，继续培养3天获取CT细胞；5)将DC细胞、CIK细胞、NK细胞、CTL细胞分别进行洗涤、离心得到细胞悬液；将过滤后的细胞悬液混合，并加入质量浓度为1.2‑1.5％的人血白蛋白、胸腺五肽与生理盐水，得到细胞制剂。