[发明专利]一种隐性乳房炎试剂盒

摘要

本发明涉及动物医学检测领域，具体提供了一种隐性乳房炎试剂盒，通过检测与奶牛乳房炎相关的炎症因子IL‑1β、IL‑2、PGE2的变化来建立诊断奶牛隐性乳房炎的新方法，该方法通过定量检测牛奶中乳房炎相关炎症因子，与临界值进行比较，从而达到早发现早治疗，以减少乳房炎带来的经济损失的目的，适合工业化生产，保存期长。

主权项

1.IL‑1β或IL‑2或PGE2的单克隆抗体在制备检测隐性乳房炎试剂盒中的应用，其特征在于：试剂盒中包含有：预包被与隐性乳房炎相关单克隆抗体的酶标板，其中所述的与隐性乳房炎相关单克隆抗体为IL‑1β或IL‑2或PGE2的抗体，所述预包被与隐性乳房炎相关单克隆抗体的酶标板，制备方法如下：用0.05M pH9.6的碳酸盐包被缓冲液将纯化的IL‑1β或IL‑2或PGE2抗体稀释至蛋白质含量为2μg/ml，在8×12孔聚苯乙烯酶标板的反应孔中按照每孔0.1ml加入稀释后的抗体，4℃过夜孵育，弃去孔内溶液，用洗涤液洗涤三次；用0.5%的牛血清白蛋白37℃封闭1小时，弃去孔内溶液，用洗涤液洗3次，将包被好的酶标板干燥后放入密封袋或锡袋中备用；所述试剂盒中还含有包被缓冲液、样品稀释液、标准品稀释液，酶标试剂，浓缩洗涤液，原倍标准品，显色剂A液和显色剂B液以及终止液；所述的预包被时采用的包被缓冲液为0.05M pH9.6的碳酸盐缓冲液，其1L溶液中含1.59gNa2CO3，2.93g NaHCO3；样品稀释液和标准品稀释液为含有0.5wt%BSA的pH为7.4的0.01mol/L PBS缓冲液；酶标试剂分别为辣根过氧化物酶标记的IL‑1β或IL‑2或PGE2抗体；浓缩洗涤液为含有体积浓度为0.5‰的吐温－20的0.02mol/L的pH 7.4的磷酸盐缓冲液；原倍标准品分别为96ng/L的IL‑1β、640ng/L 的IL‑2和1200ng/L的PGE2；显色剂A液为双氧水；显色剂B液为底物TMB；终止液为4 mol/L的硫酸。