[发明专利]一种水体中浮游植物叶绿素a提取与测定方法

摘要

本发明涉及水环境监测领域，具体地说是一种水体中浮游植物叶绿素a提取与测定方法。其具体步骤如下：(1)水样的采集；(2)水样的浓缩；(3)叶绿素a的提取；(4)标准曲线的绘制；(5)叶绿素a的测定。本发明提供了一种水体中浮游植物叶绿素a提取与测定方法，操作简单，转移次数少，降低了样品的损失；避免了研磨中的人为误差，数据较为稳定，精度较高；检测快捷，同时尽可能的减少了人体与丙酮的接触的时间。

主权项

一种水体中浮游植物叶绿素a提取与测定方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)水样的采集：在水面以下0.5m通过水样采集器采集500ml水样，存于棕色玻璃瓶中，并加入0.5％碳酸镁悬浊液1ml，以防止酸化引起色素溶解；(2)水样的浓缩：在抽滤器上装好滤膜，使用0.45μm醋酸纤维滤膜，倒入100ml水样进行抽滤，抽滤时负压不能过大，在水样刚刚完全通过滤膜时结束抽滤，用滤纸吸干剩余水分，每个水样需准备2个滤膜用来做平行实验；(3)叶绿素a的提取：将抽滤后的滤膜放入比色管中，放入‑5℃低温中冷冻20min，取出放置于室温下5min，此过程反复5次后向比色管中加入10ml的90％丙酮溶液，剧烈震荡后放置于4℃中避光提取12小时，期间应再震荡3次以上，最后放入高速离心机以5000r/min速度离心30min；(4)标准曲线的绘制：使用标准储备液稀释至一定浓度作为标准使用液，通过分子荧光光谱仪以定量模式进行荧光强度测定，并以90％丙酮溶液为空白参比测定荧光强度，绘制一定叶绿素a浓度与荧光强度标准曲线；(5)叶绿素a的测定：取上清液于分子荧光光谱仪比色皿中，用90％丙酮溶液作参比，即空白荧光强度测定，读取荧光强度值，通过查标准曲线并代入公式ρ＝C*0.1(C为标准曲线上叶绿素a浓度)，求得最后叶绿素a的浓度。