[发明专利]一种快速定性定量检测粮食中农残含量的方法

摘要

本发明公开了一种快速定性定量检测粮食中农残含量的方法，包括粮食样品利用水和乙腈进行萃取，利用特定检测条件的高分辨液质联用仪进行混标与样品的分离检测，对比一级、二级碎片离子定性，再采用色谱中峰面积响应强度进行定量。本发明可以使54种农残在20min内实现有效分离，线性范围内具有良好的相关系数R2>0.999，最低检出限低于1μg/kg，回收率介于72%～120%。本发明简化了样品前处理过程，改进了国标检测农残过程的繁琐，分析时间长，定量限高等缺点；并且可以实现有机磷和氨基甲酸酯类农残的分离，高分辨质谱分子量可以精确到小数点后四位，实现快速定性并定量检测粮食中农残的含量。

主权项

1.一种快速定性定量检测粮食中农残含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：1）农药混标的配制：精确配制54种农药混标，即倍硫磷、苯噻酰草胺、吡虫啉、吡蚜酮、苄嘧磺隆、丙环唑、残杀威、哒螨灵、稻瘟灵、丁草胺、啶虫脒、毒死蜱、多菌灵、恶虫威、二甲戊灵、二嗪农、氟环唑、甲胺磷、甲拌磷、甲基毒死蜱、甲基谷硫磷、甲基嘧啶磷、甲萘威、甲氰菊酯、甲霜灵、井冈霉素、久效磷、抗蚜威、克百威、乐果、绿麦隆、氯虫苯甲酰胺、氯氟吡氧乙酸、马拉硫磷、咪鲜胺、嘧菌酯、灭多威、噻虫嗪、噻呋酰胺、噻嗪酮、三环唑、三唑酮、杀螟硫磷、双硫磷、速灭威、特丁硫磷、五氟磺草胺、戊唑醇、烯唑醇、辛硫磷、乙硫磷、异丙隆、异丙威、仲丁威，用甲醇配制母液并用甲醇逐个稀释到100ug/kg，按照倍数1：2：4：8：16：32：64：128稀释配制8个标液，待测；2）待测粮食样品的制备：准确称取粉碎的待测样品，萃取、净化后过0.22μm有机相滤头，待测；3）步骤1）混标和步骤2）样品分别采用高分辨Q‑Exactive液质联用仪按以下液相和质谱条件进行检测，液相色谱条件：色谱柱：HypersilGOLDC18色谱柱100mm×2.1mm，3μm；流动相：A：5mM甲酸铵水溶液+0.1%甲酸，B：甲醇；流速：0.30mL/min；柱温：40℃；进样量：5μL；梯度洗脱程序：时间(time)0.00.512.016.016.120.0A%5510010055B%9595009595                                                                        ；质谱条件：离子源：电喷雾离子源ESI；扫描方式：正离子扫描；检测方式：Full‑MS/t‑MS2模式；鞘气压力：35arb；辅助气压力：10arb；毛细管电压：3.80kv+，3.20kv‑；毛细管温度：350℃；探针温度：300℃；分辨率：70，000；扫描范围：56‑840m/z，Full‑MS扫描模式；HCD碰撞能量：35eV；4）通过ToxID软件中农残数据库的精确质量数和保留时间筛选混标中和粮食样品中农残，然后对比样品与标品的Full‑MS模式检测的一级碎片离子定性以及t‑MS2模式检测的二级碎片离子定性，得到色谱图后采用定量软件，通过标准曲线自动计算得到测定液的样品浓度；粮食中农残含量W₀按以下公式计算：，式中C₀为测定液样品的浓度，单位ug/L；M为样品质量，单位g；V为加入乙腈体积，单位mL。