[发明专利]一种酶法制备(S)-环氧苯乙烷的方法有效
| 申请号： | 201610535106.0 | 申请日： | 2016-07-07 |
| 公开（公告）号： | CN105969837B | 公开（公告）日： | 2019-12-24 |
| 发明（设计）人： | 邬敏辰;胡蝶;王瑞;叶慧华;唐诗涵;李剑芳 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12P41/00 | 分类号： | C12P41/00;C12P17/02 |
| 代理公司： | 23211 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 | 代理人： | 耿晓岳 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种酶法制备(S)‑环氧苯乙烷的方法，属于生物催化技术领域。本发明在正己醇/缓冲液的双相体系中，利用来源于宇佐美曲霉的环氧化物水解酶催化外消旋环氧苯乙烷的水解动力学拆分，制备(S)‑环氧苯乙烷的方法；与单相反应体系相比，动力学拆分rac‑SO的浓度从24g/L提高至120g/L；时空产率从为3.1g/L/h提高至20.3g/L/h；动力学拆分120g/Lrac‑SO制备(S)‑SO的ee值从36.8％提高至98.3％，并实现了(S)‑SO的克级制备。本发明方法工艺简单、产物的对映体纯度和得率高、催化效率高和环境友好，具有较大工业化应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 法制 环氧苯 乙烷 方法 | ||
【主权项】：
1.一种制备(S)-环氧苯乙烷的方法，其特征在于，具体的制备方法为：1.2g rac-SO溶解在5mL正己醇中，加入5mL浓度为40mg/mL reAuEH2酶液，添加酶的质量为0.2g，至终体积为10mL，底物质量与酶质量比例值为6，在25℃和220rpm条件下反应；所述reAuEH2的基因来源于宇佐美曲霉，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；/n所述reAuEH2的制备方法为：挑取E.coli/(reAuEH2)单菌落于LB培养基中37℃条件下培养12h，以体积分数2％的接种量转接入新鲜的100mL的LB培养基中，37℃条件下培养2h后，加入0.2mM IPTG诱导剂28℃培养8h，诱导reAuEH2的高效表达，重组细胞经8 000rpm离心收集，加入50mM，pH＝7.0磷酸盐缓冲液悬浮，超声破碎后离心收集上清液，经10KDa的超滤离心管浓缩，获得的reAuEH2酶液，测定其蛋白含量为40mg/mL，比酶活力为3.8U/mg。/n
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