[发明专利]一种邻位氯代羟基苯并吡啶的生物转化合成方法有效
| 申请号： | 201610522039.9 | 申请日： | 2016-07-01 |
| 公开（公告）号： | CN106148447B | 公开（公告）日： | 2018-10-23 |
| 发明（设计）人： | 占纪勋 | 申请（专利权）人： | 杭州唯铂莱生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/52 | 分类号： | C12N15/52;C12P17/12;C12R1/19 |
| 代理公司： | 广州市越秀区哲力专利商标事务所(普通合伙) 44288 | 代理人： | 胡拥军 |
| 地址： | 310000 浙江省杭州市余杭*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开一种邻位氯代羟基苯并吡啶的生物转化合成方法，包括：将来源于厚垣普奇尼亚菌的不含内含子的黄素氯代酶基因导入大肠杆菌中；诱导大肠杆菌表达黄素氯代酶；向已表达黄素氯代酶的大肠杆菌培养体系中加入羟基苯并吡啶；黄素氯代酶催化羟基苯并吡啶形成邻位氯代羟基苯并吡啶。该方法具有取代位点特异性高，产物产率高，不受原料来源限制，操作过程易控制，生产成本低等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 邻位氯代 羟基 吡啶 生物转化 合成 方法 | ||
【主权项】：
1.一种邻位氯代羟基苯并吡啶的生物转化合成方法，其特征在于：将来源于厚垣普奇尼亚菌(Pochonia chlamydosporia)ATCC16683的黄素氯代酶基因的外显子序列导入大肠杆菌中；诱导大肠杆菌表达黄素氯代酶；向已表达黄素氯代酶的大肠杆菌培养体系中加入羟基苯并吡啶；黄素氯代酶催化羟基苯并吡啶形成邻位氯代羟基苯并吡啶；所述羟基苯并吡啶为3‑羟基苯并吡啶、5‑羟基苯并吡啶、6‑羟基苯并吡啶或7‑羟基苯并吡啶中的一种；所述的黄素氯代酶基因的外显子序列通过采用F引物为5'‑aaCATATGTCGGTACCCAAGTCTTG‑3'和R引物为5'‑aaAAGCTTAACTTTGTTGAGGCCAA‑3'对厚垣普奇尼亚菌(Pochonia chlamydosporia)ATCC16683的cDNA进行扩增而获得。
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