[发明专利]一种金纳米花偶联辣根过氧化物酶和前列腺特异抗原标记抗体的制备方法在审
申请号: | 201610517740.1 | 申请日: | 2016-06-30 |
公开(公告)号: | CN106168622A | 公开(公告)日: | 2016-11-30 |
发明(设计)人: | 常津;武玉东;宫晓群 | 申请(专利权)人: | 天津大学 |
主分类号: | G01N33/535 | 分类号: | G01N33/535;G01N33/574 |
代理公司: | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人: | 王丽 |
地址: | 300072*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明涉及一种金纳米花偶联辣根过氧化物酶和前列腺特异抗原标记抗体的制备方法;利用金纳米花纳米粒子和前列腺特异抗原标记抗体以及辣根过氧化物酶的静电吸附作用,制备多酶标记的金纳米花前列腺特异抗原免疫探针,对前列腺特异抗原(PSA),这种广泛存在前列腺疾病的蛋白标志物进行定性定量的检测,建立蛋白标志物检测的新方法,极大程度提高了检测灵敏度。本发明的特点在于:整个制备过程简单,适合于产业化生产;金纳米花纳米粒子偶联辣根过氧化物酶和前列腺特异抗原标记抗体,检测探针将同时具有免疫活性和酶催化活性,所得检测探针为多酶标记探针,实现了纳米领域的纳米增强效应,可有效提高检测灵敏度。 | ||
搜索关键词: | 一种 纳米 花偶联 辣根过氧化物酶 前列腺 特异 抗原 标记 抗体 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种金纳米花偶联辣根过氧化物酶和前列腺特异抗原标记抗体的制备方法;其特征是步骤如下:(1)将氯金酸(HAuCl4)加入到反应器,加热煮沸后注入柠檬酸钠,冷却至室温,得到金种溶液(Gold seeds);(2)通过氢氧化钠调节氯金酸pH4.2~11.0,加入羟胺盐酸(NH2OH.HCl)和上述金种溶液,其中HAuCl4:NH2OH.HCl:Gold seeds=14:17:1,最后得到金纳米花纳米粒子(AuNFs);(3)将金纳米花纳米粒子(AuNFs)超声处理加入反应器,加入前列腺特异抗原PSA标记抗体(Ab1)和辣根过氧化物酶(HRP)混合液,所得AuNFs、HRP和Ab1混合液在旋转混合架上旋转过夜,最后离心得到multi‑HRP‑AuNFs‑Ab1检测探针。
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