[发明专利]一种快速检测氯霉素的电化学适配体传感器

摘要

本发明公开了一种快速检测氯霉素的电化学适配体传感器，所述电化学适配体传感器是适配体与纳米复合物上的银纳米粒子通过银硫键固定在玻碳电极上组装而成，样品中的氯霉素被定量捕捉到传感器表面，在纳米复合物的催化作用下产生电信号；本发明的电化学适配体传感器具有灵敏度高、响应快、操作简便、成本低廉，选择性好，对推广适配体传感器在医药分析、食品安全等方面的实际应用具有重要的意义。

主权项

1.一种快速检测氯霉素的电化学适配体传感器，所述电化学适配体传感器含有ACT TCA GTG AGT TGT CCC ACG GTC GGC GAG TCG GTG GTA G碱基序列的适配体，且该碱基系列的5’端修饰了SH‑(CH2)6，其特征在于：所述电化学适配体传感器是适配体与纳米复合物上的银纳米粒子通过银硫键固定在玻碳电极上组装而成，所述纳米复合物是由聚二烯二甲基氯化铵（PDDA）功能化的还原石墨烯表面静电组装银纳米粒子制成，样品中的氯霉素被定量捕捉到传感器表面，在纳米复合物的催化作用下产生电信号；上述电化学适配体传感器在制备时，包括以下步骤：①聚二烯二甲基氯化铵（PDDA）的还原石墨烯（rGO）的制备（1）将25mg的氧化石墨烯（GO）置于25mL水中，超声分散至溶液中无颗粒物，得到1mg/mL的氧化石墨烯（GO）分散液；（2）向上述分散液中加入0.5mL 20%聚二烯二甲基氯化铵（PDDA）电解质，搅拌30min后加入0.875mL的35%水合肼溶液，在100℃的油浴搅拌24h后离心分离，沉淀用水洗至中性后分散于25mL的水中，得到1mg/mL的聚二烯二甲基氯化铵（PDDA）的还原石墨烯（rGO）；②还原石墨烯银纳米粒子（rGO/AgNPs）复合物的制备（1）将0.25mL 100mM的硝酸银溶液和0.25mL 100mM的柠檬酸三钠溶液加入到室温下正在搅拌的100mL的水中，加入6mL 新配置的5mM的硼氢化钠溶液并剧烈搅拌，得到黄色胶体银纳米粒子后继续搅拌30min，静置过夜；（2）取0.5mL 1mg/mL的还原石墨烯（rGO）与4mL上述银纳米粒子室温下搅拌1h后离心分离，沉淀用水洗涤2‑3次，得到1mg/mL的还原石墨烯银纳米粒子（rGO/AgNPs）复合物；③电化学适配体传感器的制备（1）将玻碳电极使用0.3μm和0.05μm的氧化铝抛光粉上打磨，在水和乙醇中交替超声至电极表面光滑；取4μL 0.5mg/mL的还原石墨烯银纳米粒子（rGO/AgNPs）复合物滴在玻碳电极上自然晾干；（2）取10μL 5μM的氯霉素适配体滴在电极上，所述适配体中含有5mM 三(2‑羧乙基)膦盐酸盐（TCEP）活化巯基，将电极在4℃下培育16h，用10mM的三羟甲基氨基甲烷酸盐缓冲液（Tris‑HCl）洗去多余的适配体，滴加10μL 1mM 的巯基己醇进行活性位点的封闭1h，用10mM的三羟甲基氨基甲烷酸盐缓冲液（Tris‑HCl）洗去多余的巯基己醇，在氮气的环境下晾干电极即得电化学适配体传感器，将制好的电化学适配体传感器置于4℃保存待用。