[发明专利]一种基于CdS@SnS2@MWCNTs无标记型胰岛素光电免疫传感器的制备方法及应用

摘要

本发明涉及一种基于CdS@SnS2@MWCNTs无标记型胰岛素光电免疫传感器的制备方法及应用。具体是将具有高的光电转换效率的CdS@SnS2@MWCNTs修饰于导电玻璃表面为光活性基底材料，制备无标记型胰岛素光电免疫传感器，实现对胰岛素抗原的简单、高灵敏检测。属于新型功能材料与生物传感检测技术领域。

主权项

一种基于CdS@SnS2@MWCNTs无标记型胰岛素光电免疫传感器的制备方法，其特征在于，步骤如下：（1）SnS2@MWCNTs的制备将30~50 mg MWCNTs 溶解于30 mL超纯水中，超声4 h，3~6 mmol SnCl4·5H2O加入到上述溶液中，搅拌4 h后，10~15 mmol 硫代乙酰胺加入到上述溶液中，搅拌30 min，将此混合溶液转移至50 mL的聚四氟乙烯反应釜中，160℃条件下保持8~12 h，冷却至室温，离心分离，用超纯水和无水乙醇洗涤3次，于真空干燥箱中50℃干燥12 h，制得SnS2@MWCNTs复合材料；（2）CdS@SnS2@MWCNTs的制备向30~70 mL 1.0 ×10‑2 mol/L CdCl2溶液中通氮气30 min，去除溶液中的氧气，随后，60 mg SnS2@MWCNTs粉末加入到上述溶液中，氮气氛围下，100℃回流30 min，冷却至室温，离心分离，用超纯水洗涤3次，于真空干燥箱中50℃干燥12 h，制得CdS@SnS2@MWCNTs复合材料。（3）ITO 电极的预处理：将ITO导电玻璃切割至1.0 cm × 2.5 cm大小，依次用洗洁精、丙酮、乙醇和超纯水超声清洗30 min，用氮气吹干；（4）滴加5~7 µL、2~5 mg/mL CdS@SnS2@MWCNTs溶液于电极表面，室温条件下晾干；（5）将电极于3 mmol/L 巯基乙酸溶液中浸润0.5~1.5 h，室温条件下晾干，超纯水冲洗；（6）滴加 2~4 µL、含0.01 mol/L 1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐、0.002 mol/L N‑羟基琥珀酰亚胺的混合溶液于电极表面，继续滴加5~7 µL、1~3 µg/mL的胰岛素捕获抗体，4℃冰箱中晾干，超纯水冲洗；（7）滴加5~7 µL、质量分数为0.5 ~ 2.0%的BSA溶液于电极表面，以封闭电极表面上非特异性活性位点，4℃冰箱中晾干；（8）用超纯水清洗，晾至湿润状态，将5~7 μL、0.1 pg/mL ~ 5 ng/mL不同浓度的胰岛素抗原溶液滴涂于电极表面，使其与胰岛素捕获抗体发生特异性免疫反应，4℃冰箱中孵化1 h，用超纯水冲洗以除去未结合的胰岛素抗原，室温下晾干，制得一种基于CdS@SnS2@MWCNTs无标记型胰岛素光电免疫传感器。