[发明专利]一种负载光敏剂的聚合物胶束的制备方法及该胶束在浮游细菌、细菌生物被膜杀灭中的应用

摘要

一种负载光敏剂的聚合物胶束的制备方法及该胶束在浮游细菌、细菌生物被膜杀灭中的应用，是由两种嵌段聚合物PEG‑b‑PCL和PCL‑b‑PAE制得负载光敏剂的聚合物胶束，并用于多耐药细菌和生物被膜的杀灭。本发明的复合壳层胶束负载的光敏剂对卡那霉素有耐药性的生物发光基因转染的金黄色葡萄球菌S.aureus Xen36以及对生物被膜中的耐药细菌均有很好的杀菌效率。本发明的胶束体系有如下的优势：1)制备简单；2)光源简单，不需要像激光一样的复杂控制器，而且光能量很低，容易向临床方向转化；3)有很好的单线态氧产生效率；4)对耐药的细菌和生物被膜有很好的杀灭效果，具有很好的应用前景。

主权项

1.一种负载光敏剂的聚合物胶束的制备方法，其特征在于步骤如下：1)将同重量比的嵌段共聚物PEG‑b‑PCL和PCL‑b‑PAE混合，溶解于4mL四氢呋喃中，配制得到2.5mg mL–1的溶液，取200μL原卟啉的DMF溶液与4mL含有聚合物的THF溶液混合均匀；2)将聚合物有机溶液逐滴缓慢地加入到剧烈的搅拌条件下的12mL醋酸盐缓冲液中，水溶液逐渐由无色透明变为泛着微弱蓝色乳光，证明胶束的形成；3)将得到的胶束溶液在磷酸盐缓冲液中用截留分子量为7000的透析袋透析三天，以除去有机溶剂；最后加入磷酸盐缓冲液定容到20mL，得到浓度为0.5mg mL–1的复合壳层胶束溶液MSPMs；聚乙二醇‑b‑聚环己内酯的制备步骤如下：1)将2.0g CH3O‑PEG114‑OH和4.2g重蒸处理过的ε‑CL加入到50mL干燥的Schlenk瓶中；2)加入15mL重蒸过的无水甲苯溶解，加入一滴Sn(Oct)2；3)通过液氮冷冻—抽真空—充氮气—解冻，循环三次；4)氮气保护下于100℃的油浴中反应过夜；5)反应完毕后冷至室温，加入适量二氯甲烷稀释，然后在冰乙醚中沉淀；待沉淀完全后，抽滤，滤饼用冰乙醚洗涤三次，真空干燥后所得到的白色粉末状固体即为PEG5k‑b‑PCL；聚环己内酯‑b‑聚β‑氨酯制备步骤如下：1)将127mg苯甲醇和11.4g重蒸过ε‑CL加入干燥过的Schlenk瓶中，然后加入15mL无水甲苯溶解均匀，加入230mg Sn(Oct)2；2)液氮冷冻，抽真空，通氮气，解冻，重复此过程三次，之后在氮气保护下，于100℃的油浴中反应过夜；3)反应结束后冷至室温，加入适量的二氯甲烷稀释，然后冰乙醚沉淀，在冰箱中静置过夜使其沉淀完全，经抽滤洗涤，真空干燥后得到白色粉末状固体PCL‑OH；4)称取3.0g PCL‑OH置于50mL干燥的圆底烧瓶中，用6mL无水二氯甲烷溶解，然后加入0.15g无水三乙胺，将圆底烧瓶置于冰水浴中搅拌使其混合均匀；5)用10mL无水二氯甲烷将0.108g丙烯酰氯缓慢地逐滴滴入到圆底烧瓶中，滴完后，逐步升温至室温，在氮气气氛下继续室温反应12h；6)反应完毕后，反应液用二氯甲烷稀释，依次用稀盐酸、饱和碳酸钠水溶液和蒸馏水洗涤，分离得到的有机相用无水硫酸镁干燥过夜，有机相过滤之后将滤液旋蒸浓缩，并在冰乙醚中沉淀；7)将沉淀抽滤后置于真空烘箱中干燥，即可得聚合物末端基团为丙烯酸酯功能化的PCL‑A；8)称取1.0g PCL‑A，0.68g HDD和0.65g TDP置于50mL干燥的圆底烧瓶中，加入10mL重蒸的氯仿溶解使其混合均匀，然后在55℃的油浴中反应72h；9)反应结束后，加入适量的氯仿稀释并用冰乙醚沉淀，抽滤并用冰乙醚洗涤，真空干燥后得到淡黄色粉末状固体，即为PCL‑b‑PAE。