[发明专利]一种快捷的观赏海棠组培苗瞬时基因沉默的方法在审
| 申请号： | 201610391259.2 | 申请日： | 2016-06-03 |
| 公开（公告）号： | CN106047920A | 公开（公告）日： | 2016-10-26 |
| 发明（设计）人： | 姚允聪;田佶;宋婷婷;张杰;韩振云 | 申请（专利权）人： | 北京农学院 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;A01H5/00 |
| 代理公司： | 北京凯特来知识产权代理有限公司 11260 | 代理人： | 郑立明;赵镇勇 |
| 地址： | 102206*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种快捷的观赏海棠组培苗瞬时基因沉默的方法，将沉默目的基因片段通过酶切连接的方式连接到TRV‑GFP载体，转化农杆菌后，通过调整真空抽吸压强和抽吸方式，将携带沉默目的基因的TRV‑GFP载体侵染入观赏海棠组培苗中；进一步通过抗生素培养和手提紫外灯荧光筛选，得到观赏海棠沉默阳性株系；沉默目的基因的观赏海棠组培苗阳性植株在侵染7天后，进行表型观察和半定量PCR筛选，从而构建完整的观赏海棠瞬时基因沉默体系。能够快速、高效的侵染观赏海棠组培苗植株，并能够方便进行沉默阳性植株筛选，进行基因沉默分析，改进了木本植物瞬时表达效率低等缺陷，能够应用于观赏海棠基因功能研究，为今后的观赏海棠遗传育种工作奠定基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 快捷 观赏 海棠 组培苗 瞬时 基因 沉默 方法 | ||
【主权项】：
一种快捷的观赏海棠组培苗瞬时基因沉默的方法，其特征在于，包括步骤：将沉默目的基因片段通过酶切连接的方式连接到TRV‑GFP载体，转化农杆菌后，通过调整真空抽吸压强和抽吸方式，将携带沉默目的基因的TRV‑GFP载体侵染入观赏海棠组培苗中；进一步通过抗生素培养和手提紫外灯荧光筛选，得到观赏海棠沉默阳性株系；沉默目的基因的观赏海棠组培苗阳性植株在侵染7天后，进行表型观察和半定量PCR筛选，从而构建完整的观赏海棠瞬时基因沉默体系。
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