[发明专利]一种多糖同时富集与近同重标记的定量分析方法

摘要

本发明涉及一种多糖同时富集与近同重标记的定量分析方法。将两组不同生理或病理条件的多糖分别作为控制组与疾病组，分别进行N‑乙酰葡糖胺醛基的全部氨基化同重标记，分别标记为‑CH₂¹⁵NHCH₂COOR_f和‑CH₂NHCH₂¹³COOR_f，其中R_f为C₃F₇CH₂CH₂PhCH₂‑，其标记后含氟标签的多糖的质量差异为6.32mDa；同重标记后两组多糖按等比例混合进行质谱分析得到一个数据组；对数据组进行定性、定量数据库搜索，得到多糖的拓扑结构及疾病组每一个多糖相对于控制组的相对比例，即疾病条件下所有多糖的上调或下调情况。本发明不仅标记效率高，准确度高，便宜易得；而且自带氟富集标签，将大大增强带标记多糖的富集效率、电喷雾电离效率和质谱分析灵敏度和效率，适用于N‑多糖基于高分辨串级质谱分析的定量。

主权项

1.一种多糖同时富集与近同重标记的定量分析方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将两组不同生理或病理条件的多糖分别作为控制组与疾病组，分别进行N‑乙酰葡糖胺醛基的全部氨基化同重标记，分别标记为‑CH215NHCH2COORf和‑CH2NHCH213COORf，其中Rf为C3F7CH2CH2PhCH2‑，其标记后含氟标签的多糖的质量差异为6.32mDa；(2)同重标记后两组多糖按等比例混合进行高效液相色谱分离，高分辨质谱和串级质谱分析得到一个数据组；(3)对数据组进行定性、定量数据库搜索，得到多糖的拓扑结构及疾病组每一个多糖相对于控制组的相对比例，即疾病条件下所有多糖的上调或下调情况，上调或下调倍数最大的多糖即为与该疾病发生相关的多糖。