[发明专利]沙雷氏菌脂肪酶突变体、重组表达转化子、酶制剂及应用

摘要

本发明涉及沙雷氏菌脂肪酶(SmL)分子改造所得的突变体、其基因和氨基酸序列，含有该突变体基因的重组表达质粒及重组表达转化子，重组酶制剂的制备方法，以及该酶制剂在地尔硫卓前体合成中的应用。与野生型沙雷氏菌脂肪酶相比，本发明的突变体活性显著提高，并保持了优异的立体选择性，在心血管病药物地尔硫卓的关键手性前体(–)‑对甲氧苯基缩水甘油酸甲酯的工业生产中具有良好的应用前景。

主权项

1.一种活性提高的沙雷氏菌脂肪酶突变体，其特征在于，其选自如下序列对应的蛋白质：(1)SEQ ID No.2所示氨基酸序列的第271位丝氨酸替换为苯丙氨酸；或，(2)SEQ ID No.2所示氨基酸序列的第311位色氨酸替换为甲硫氨酸；或，(3)SEQ ID No.2所示氨基酸序列的第315位亮氨酸替换为丝氨酸；或，(4)SEQ ID No.2所示氨基酸序列的315位亮氨酸替换为丝氨酸，同时271位丝氨酸替换为苯丙氨酸；或，(5)SEQ ID No.2所示氨基酸序列的315位亮氨酸替换为丝氨酸，同时311位色氨酸替换为甲硫氨酸；或，(6)SEQ ID No.2所示氨基酸序列的271位丝氨酸替换为苯丙氨酸，同时311位色氨酸替换为甲硫氨酸；或，(7)SEQ ID No.2所示氨基酸序列的315位亮氨酸替换为丝氨酸，同时271位丝氨酸替换为苯丙氨酸，同时311位色氨酸替换为甲硫氨酸。