[发明专利]一种防止PCR污染的方法及其应用在审
| 申请号： | 201610348311.6 | 申请日： | 2016-05-24 |
| 公开（公告）号： | CN106337045A | 公开（公告）日： | 2017-01-18 |
| 发明（设计）人： | 丁旭;候美玲;韩海燕 | 申请（专利权）人： | 微基生物科技（上海）有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 上海浦一知识产权代理有限公司31211 | 代理人： | 王函 |
| 地址： | 201209 上海市浦*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种防止PCR污染的方法，包括如下步骤(1)在去除了引物和模板的常规PCR反应体系中加入一定量的Benzonase核酸酶，使其在适当温度下酶切发挥作用，将存在于PCR反应体系中的外源微生物或气溶胶污染的DNA消化干净；(2)经过Benzonase核酸酶处理后的PCR反应体系在高温下维持一段时间，将反应液中的Benzonase核酸酶灭活；(3)添加相应的引物和模板进行后续的PCR扩增。本发明还公开了上述方法在普通定性PCR、荧光定量PCR、高通量测序分子建库中的应用。本发明能有效克服PCR扩增过程中出现的外源微生物DNA或PCR产物气溶胶污染问题，且在高通量测序中有广阔的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 防止 pcr 污染 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
一种防止PCR污染的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)在去除了引物和模板的常规PCR反应体系中加入一定量的Benzonase核酸酶，使其在适当温度下酶切发挥作用，将存在于PCR反应体系中的外源微生物或气溶胶污染的DNA消化干净；(2)经过Benzonase核酸酶处理后的PCR反应体系在高温下维持一段时间，将反应液中的Benzonase核酸酶灭活；(3)添加相应的引物和模板进行后续的PCR扩增。
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