[发明专利]蓝莓RNA的提取方法在审

专利信息
申请号: 201610345498.4 申请日: 2016-05-24
公开(公告)号: CN105969763A 公开(公告)日: 2016-09-28
发明(设计)人: 肖家欣;许庆龙;高轩;樊基胜;张春龙;李晴晴;鲁珊珊 申请(专利权)人: 安徽师范大学
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10
代理公司: 北京润平知识产权代理有限公司 11283 代理人: 张苗;罗攀
地址: 241002 安徽省芜*** 国省代码: 安徽;34
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摘要: 发明公开了一种蓝莓RNA的提取方法,该方法为:1)将蓝莓组织研磨成蓝莓粉末,将蓝莓粉末与抽提溶剂中混合并孵育得到孵育混合液;2)将孵育混合液进行抽提处理得到抽提上清液;3)将抽提上清液与氯化锂溶液混合,静置过夜、离心处理得到总RNA沉淀;4)将总RNA沉淀溶解于DEPC处理的超纯水中,接着于氯仿/异戊醇混合液中进行抽提处理,进行离心处理以得离心上清液;5)将离心上清液与醋酸钠溶液混合,加异丙醇进行静置处理,离心处理得到沉淀物;6)将沉淀物通过乙醇溶液进行清洗得到清洁沉淀物;7)将清洁沉淀物敞口放置,加DEPC处理的超纯水得到蓝莓RNA。通过该方法能够提取纯度优异的蓝莓RNA且提取率高。
搜索关键词: 蓝莓 rna 提取 方法
【主权项】:
一种蓝莓RNA的提取方法,其特征在于,所述提取方法包括:1)先将蓝莓组织在液氮的存在下研磨成蓝莓粉末,再将所述蓝莓粉末与抽提溶剂中混合并孵育以得到孵育混合液;2)将孵育混合液于氯仿/异戊醇混合液中进行抽提处理以得到抽提上清液;3)将所述抽提上清液与氯化锂溶液混合,接着进行静置过夜处理,然后进行离心处理以得到总RNA沉淀;4)将所述总RNA沉淀溶解于DEPC处理的超纯水中,接着于氯仿/异戊醇混合液中进行抽提处理,然后进行离心处理以得到离心上清液;5)将所述离心上清液与醋酸钠溶液混合,接着加入异丙醇,然后进行静置处理,最后进行离心处理以得到沉淀物;6)将所述沉淀物通过乙醇溶液进行清洗以得到清洁沉淀物;7)将所述清洁沉淀物敞口放置,然后加入DEPC处理的超纯水以得到蓝莓RNA;其中,抽提溶剂含有CTAB抽提液与β‑巯基乙醇;所述于氯仿/异戊醇混合液中进行抽提处理为:将待抽提物与氯仿/异戊醇混合液混合,接着进行冰浴,最后进行离心处理取上清液;所述乙醇溶液的清洗为:将待清洗物溶于乙醇溶液中,然后离心处理取下层沉淀。
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