[发明专利]基于纳米孔道和电化学传感定量检测端粒酶活性的方法有效
申请号: | 201610319908.8 | 申请日: | 2016-05-13 |
公开(公告)号: | CN105806912B | 公开(公告)日: | 2018-06-12 |
发明(设计)人: | 卫敏;刘叙;卫伟 | 申请(专利权)人: | 河南工业大学 |
主分类号: | G01N27/327 | 分类号: | G01N27/327 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 李明 |
地址: | 450001 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | 本发明公开一种基于纳米孔道和电化学传感的端粒酶活性检测方法,本方法步骤如下:首先,在多孔阳极氧化铝模板或聚对苯二甲酸乙二醇酯膜的纳米孔道内壁连接端粒酶识别序列作为引物;然后,端粒酶对引物进行扩增,形成的富G序列;在钾离子存在下形成G‑四链体;利用电化学工作站对通过纳米孔道的指示分子产生的电流进行电化学检测。本发明无需制备复杂材料以及标记DNA探针,可避免材料制备及标记DNA探针而导致检测成本高、操作烦琐,重现性差的缺陷。本发明具有成本低、快速、简便、灵敏度高、准确性好的优点。 | ||
搜索关键词: | 纳米孔道 端粒酶活性 电化学 标记DNA 端粒酶 传感 探针 聚对苯二甲酸乙二醇酯膜 多孔阳极氧化铝模板 电化学工作站 电化学检测 材料制备 定量检测 复杂材料 内壁连接 指示分子 灵敏度 对引物 钾离子 四链体 重现性 检测 扩增 引物 制备 | ||
【主权项】:
基于纳米孔道和电化学传感检测端粒酶活性的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)细胞的培养以及端粒酶的提取;(2)在多孔阳极氧化铝模板或聚对苯二甲酸乙二醇酯膜的纳米孔道内壁连接5’端修饰了‑CHO的端粒酶引物;(3)用细胞中提取的端粒酶对连接到纳米孔道内壁的端粒酶引物进行扩增,得到重复的富G序列;(4)在加入钾离子的条件下富G序列的空间构型发生变化,形成G‑四链体;(5)利用电化学方法对通过纳米孔道的铁氰化钾或邻苯二酚指示分子产生的电流进行检测。
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