[发明专利]基于多功能净化柱-高效液相色谱法检测食品中毒黄素的方法

摘要

本发明开发了一种基于多功能净化柱净化‑高效液相色谱法检测食品中毒黄素残留的方法。食品样品采用80mL乙腈+20mL水溶解、超声提取，通过多功能净化柱净化，取净化液5.0mL通过N₂吹干，1.0mL水定容得到上机液。该发明实现了检测样品中毒黄素残留时，净化效果好、定量准确，消除了溶剂效应对毒黄素色谱行为的影响。流动相以甲醇和水梯度洗脱，增强了毒黄素在反相色谱柱中的保留，实现了样品分析时毒黄素与其他干扰物的有效分离，从而达到准确定量的目的。该发明在样品净化过程中可有效去除样品中的脂类、色素和蛋白质等干扰，净化效果佳，定量分析准确性好、灵敏度高、结果重现性好，适用于多种食品中毒黄素残留检测。

主权项

一种基于多功能净化柱‑高效液相色谱法检测食品中毒黄素的方法 ，其特征在于，包括以下步骤：（1）样品提取条件：称取20~25 g样品，混合于由80mL乙腈和20mL水组成的100 mL提取液中，超声提取30 min，取提取液，5000 r/min离心5 min，得到上清液；（2）样品净化：取步骤（1）获得的上清液10 mL，过多功能净化柱MycoSep226 AflaZon+进行净化；净化后，取净化液5.0 mL，用N₂吹干，再用1.0 mL纯水定容，涡旋溶解后得到上机液；（3）色谱分析条件：将步骤（2）获得的上机液经配有DAD检测器的四元低压或二元高压液相色谱系统进行色谱分析，色谱柱：ODS 反相色谱柱，250*4.6 mm, 5µm；流动相为：甲醇与水梯度洗脱，0~10 min，甲醇与水体积比为7：93；10~20 min，甲醇与水体积比为98：2；20 ~27 min，甲醇与水体积比为7:93; 进样量：20 µL；流速：1.0 mL/min；柱温：30℃；检测波长：258 nm；（4）样品定性分析：根据步骤（3）色谱分析得到的保留时间及特征光谱图，与标样的保留时间及特征光谱图进行比对，若两者吻合，则表明含有毒黄素；（5）样品定量分析：标样配制：将毒黄素溶于水，配制成浓度分别为0.05，0.1，0.2， 0.4，1.0，2.0，5.0，10.0 μg/mL系列标准使用液；以标样响应峰面积作为纵坐标，标样浓度为横坐标，单位为μg/mL，绘制校正曲线；根据步骤（3）色谱分析获得的响应峰面积，采用外标法，对样品中毒黄素含量进行定量分析。