[发明专利]纸桦组织培养种苗繁育方法

摘要

本发明提供了一种纸桦组织培养种苗繁育方法，依次包括如下步骤：(1)选择培养一年以上的纸桦幼态嫩梢，从顶芽起向下截取带腋芽茎段的枝条，作为外植体，(2)对外植体消毒，(3)将消毒灭菌后的外植体两端分别切除0.2～0.4，接入启动培养基中培养；(4)将步骤(3)获得的无菌萌芽沿茎段纵向分割，一分为二，接种于增殖培养基中培养；(5)将步骤(4)获得的丛生芽分割成单个芽，接种于壮苗培养基中培养；(6)将步骤(5)获得单个芽接种于配置好的生根培养基中诱导生根。本发明操作简单、重复性好；种苗健壮、生长迅速，种苗大小一致，高度整齐；无愈伤组织产生，低变异、低性状分离；生根效果好，移栽存活率90％以上，经济可行。

主权项

1.纸桦组织培养种苗繁育方法，其特征在于，依次包括如下步骤：(1)外植体的选择：选择温室培养一年以上的幼态嫩梢，从顶芽起向下截取带2～6个腋芽茎段的枝条，去除叶片，切取单节带腋芽茎段作为外植体，每茎段带一腋芽，长1～2.5cm；(2)外植体进行消毒：将外植体用医用酒精棉擦拭，然后置于漂白水：无菌水体积比例为1:3～5的稀释漂白水中，震荡消毒10～30min，用无菌水洗涤；(3)启动培养：将消毒灭菌后的外植体两端分别切除0.2～0.4CM，接入启动培养基中培养；启动培养基配方为WPM+6-BA1.5mg/L+GA32.5mg/L+蔗糖30g/L，PH5.85；(4)增殖培养：将步骤(3)获得的无菌萌芽沿茎段纵向分割，一分为二，接种于增殖培养基中培养；增殖培养基为WPM+6-BA2.0mg/L+IAA0.5mg/L+GA31.0mg/L+蔗糖30g/L，PH5.85；(5)壮苗培养：将步骤(4)获得的在增值培养基中诱导出的丛生芽分割成单个芽，接种于壮苗培养基中培养；培养方法如下：暗培养36～60小时，培养温度为20～30摄氏度，其余时间光照12～20小时，黑暗6～10小时，光强2000～3000lux，培养3～5周；壮苗培养基为WPM+AC0.5g/L+蔗糖30g/L，PH5.85；(6)生根培养将步骤(5)获得单个芽切除茎段基部0.1～0.3cm，切去基部1cm以内的所有叶片，保留上部叶片，接种于配置好的生根培养基中进行诱导生根。培养基为：1/2WPM+IBA1.0mg/L+NAA0.5mg/L+AC1.0g/L+蔗糖15g/L+琼脂6.8g/L，PH5.85。