[发明专利]用于眼部的干细胞诱导培养液、其制备方法及其应用有效
| 申请号： | 201610294415.3 | 申请日： | 2016-04-29 |
| 公开（公告）号： | CN105838672B | 公开（公告）日： | 2019-11-22 |
| 发明（设计）人： | 刘广鹏;廖彩荷;许益聘;谭健;韩芳;叶信海 | 申请（专利权）人： | 上海市第十人民医院 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775;A61K35/28;A61P27/02 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 200072 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明属于生物技术领域，本发明提供一种用于眼部的干细胞诱导培养液，其包含血管内皮细胞生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和表皮生长因子(EGF)，所述血管内皮细胞生长因子(VEGF)的含量为0.5‑2.5ng/ml，所述碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的含量为0.25‑0.4ng/ml，所述表皮生长因子(EGF)的含量为0.5‑2.0ng/ml。本发明采用人眼眶脂肪来源的干细胞(ASCs)体外条件培养液对角膜损伤的再生修复发挥着重要的增强作用。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 眼部 干细胞 诱导 培养液 制备 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种用于眼部角膜上皮细胞的生长和修复的干细胞诱导培养液，其特征在于，其包含血管内皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子和表皮生长因子，所述血管内皮细胞生长因子的含量为1.0-2.0ng/ml，所述碱性成纤维细胞生长因子的含量为0.3-0.4ng/ml，所述表皮生长因子的含量为1.0-2.0ng/ml；其采用如下方法制备：/n1)先将脂肪组织去除血管、筋膜等无用组织后，制成糊状，加入胶原酶消化处理，所述胶原酶为I型胶原酶，A型胶原酶或复合型胶原酶，浓度范围为0.05-0.5％，与组织细胞的体积比范围1-2∶1；所述组织细胞为眼眶脂肪细胞；组织细胞的来源包括人在内的哺乳类动物的组织细胞；/n2)然后加入培养基进行中和处理，离心；/n3)弃去上清液后加入含有10％FBS的低糖DMEM培养基的细胞培养液进行培养；/n4)再在细胞融合至80-90％时进行消化传代，待第二代细胞生长至融合状态时，采用无血清的低糖DMEM培养液最后培养48小时而成。/n
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