[发明专利]用有机硅烷合成沙蒿多糖硫酸酯及其应用

摘要

本发明公开了一种用有机硅烷合成沙蒿多糖硫酸酯及其应用，方法包括a.多糖溶液的制备；b.沙蒿多糖硅醚衍生物的制备；c.酯化试剂的制备；d.硫酸化反应;e.保护基的除去。利用空间位阻较大的叔丁基二苯基氯硅烷保护沙蒿多糖伯羟基，区域选择性合成了沙蒿多糖硫酸酯，拓展了沙蒿多糖作为天然活性物质的应用范围。本发明中硅醚衍生物对酸的稳定程度高，在硫酸酯化反应中能更好地保护多糖伯羟基，产物的取代度和分子量可以通过硫酸化试剂的比例调节优化，以提高多糖衍生物质量要求。合成的沙蒿多糖硫酸酯作为Hela宫颈癌细胞的抑制剂应用于制备抗癌药物中。

主权项

一种用有机硅烷合成沙蒿多糖硫酸酯的方法，包括以下工艺步骤：a. 多糖溶液的制备：将沙蒿多糖加入到无水甲酰胺中，70~80℃下，转速为800~1500 rpm，搅拌8~12小时，得到沙蒿多糖的甲酰胺溶液，待用；b. 沙蒿多糖硅醚衍生物的制备：称取一定量的咪唑，加入到步骤a中的沙蒿多糖的甲酰胺溶液中，在500~1000 转/小时转速搅拌下，70~80℃活化12~24 小时，之后量取一定量的叔丁基二苯基氯硅烷，用恒压滴液漏斗以0.1~0.5 mL/min的速度滴入咪唑与沙蒿多糖的甲酰胺混合溶液中，在70~90℃下搅拌反应36~48 小时，完毕后室温下加入1‑2倍反应液体积的无水乙醇洗涤5~8 遍，直至滤液遇水不产生乳浊液沉淀为止，用0.45 μm纤维素滤膜在0.06~0.08 MPa下减压抽滤，滤饼在0.06~0.08 MPa、50~60℃下减压干燥8~12 小时，得沙蒿多糖硅醚衍生物；c. 酯化试剂的制备：在‑5~5℃下，将氯磺酸用恒压滴液漏斗以0.2～0.6 mL/分钟的速度滴加到吡啶中，滴加完毕后，在800~1500 rpm下搅拌反应20～30分钟，得到酯化试剂；d. 硫酸化反应：将步骤b得到的沙蒿多糖硅醚衍生物加入无水甲酰胺中分散，得沙蒿多糖硅醚衍生物悬浊液，加入步骤c得到的酯化试剂，于50~60℃反应60~90分钟，反应完毕后装入截留 分子量为8000~12000道尔顿的透析袋中，依次于流水中透析24~48小时、去离子水透析12~24小时，每2～5小时换水一次，透析袋内液体在50~60℃、0.06~0.08 MPa下减压浓缩至原体积的1/30~1/40呈浓缩液，再在浓缩液中加入无水乙醇进行沉淀，其中，乙醇的含量占总体积的70~85%，在0.06~0.08 MPa下减压抽滤，滤饼在0.06~0.08 MPa、50~60℃下减压干燥8~12 小时，得硫酸化衍生物；e. 保护基的除去：取步骤d一定量的硫酸化衍生物，加入四氢呋喃搅拌15~30分钟后加入四丁基氟化铵，室温下500~1000 rpm搅拌反应48~60小时，完毕后在0.06~0.08 MPa下减压抽滤，滤饼用20~50 mL无水乙醇洗涤4~5次，之后滤饼在‑60~‑50℃、1~10 Pa的条件下冷冻干燥24~48小时，得区域选择性合成的沙蒿多糖硫酸酯。