[发明专利]一种血清中GABA、Glu、DA、5-HT及苯丙胺类毒品的检测方法

摘要

本发明公开了一种血清中GABA、Glu、DA、5‑HT及苯丙胺类毒品的检测方法，包括以下步骤：S1：标准溶液的配制：包括GABA、Glu、DA、5‑TH、和苯丙胺类储备液、标准曲线工作溶液、质控工作溶液的配制以及内标化合物储备液和工作溶液的配制；S2：“空白”血清样本和吸毒人员血清样本的处理：“空白”血清样本中分别加入GABA、DA、5‑TH及苯丙胺类化合物的标准曲线溶液或质控溶液，再依次加入含Glu‑d5三氯乙酸溶液和含DA‑d4和Amp‑d6的乙腈溶液，涡旋震荡、离心，吸取上清液待测；未知生物样本除不添加标准曲线或质控工作溶液外，其它处理方式同上；S3：液相色谱‑质谱联用仪检测：将步骤S2中制得的上清液进行检测；S4：标准曲线的绘制。本发明方法具有操作简便、高效、实用的特点。

主权项

1.一种血清中GABA、Glu、DA、5‑HT及苯丙胺类毒品的检测方法，其特征在于：包括以下步骤：S1：标准溶液的配制：包括GABA、Glu、DA、5‑TH、和苯丙胺类储备液、标准曲线工作溶液、质控工作溶液的配制以及内标化合物储备液和工作溶液的配制；其中，所述苯丙胺类储备液为商品化的1mg·mL‑1的甲醇溶液，所述Glu采用内标一点法测定，无标准曲线工作溶液；其中GABA为Y‑氨基丁酸，Glu为谷氨酸，DA为多巴胺，5‑TH为羟色胺；S2：“空白”血清样本和吸毒人员血清样本的处理：吸取“空白”血清样本，分别加入GABA、DA、5‑TH及苯丙胺类化合物的标准曲线工作溶液或质控工作溶液，再依次加入含Glu‑d5三氯乙酸溶液和含DA‑d4和Amp‑d6的乙腈溶液，涡旋震荡、离心，吸取上清液待测；未知生物样本除不添加标准曲线或质控工作溶液外，其它处理方式同上，并采用50％的甲醇‑水溶液补齐预设体积；S3：液相色谱‑质谱联用仪检测：将步骤S2中获得的上清液进行检测，检测的化合物包括GABA、Glu、DA、5‑HT及苯丙胺类，所述苯丙胺类包括Amp、MA、MDA、MDMA及MDEA；其中Amp为苯丙胺，MA为甲基苯丙胺，MDA为3,4‑亚甲基二氧基苯丙胺，MDMA为3,4‑亚甲基二氧基‑N‑甲基苯丙胺，MDEA为N‑甲基二乙醇胺；所述液相色谱‑质谱联用仪为美国AgilentHP1100四元低压高效液相色谱系统，包括自动进样器、柱温箱；美国API4000QQQ型质谱仪，控制软件为Analyst1.4版本；所述液相色谱‑质谱联用仪检测方法的操作条件如下：①色谱柱：ESEpicPolarHydroC18150mm×4.6mm，5μm，接菲罗门SecurityGuardC18保护柱；②柱温：室温；③流动相：B相为甲醇：A相为0.1％甲酸‑水；④流速：0.9mL·min‑1，梯度洗脱，0～6.00min，B相5％～95％；6.01～6.50min，B相95％～95％；6.51～12.00minB相5％B；⑤进样量5μL；分流比48:52，48％洗脱液进质谱仪；⑥质谱条件：ESI离子源，正离子检测模式；碰撞气：4L·h‑1；气帘气：20L·h‑1；GS1：40L·h‑1，GS2：40L·h‑1；毛细管电压：5000V；雾化温度：500℃；多级反应监测，各化合物碰撞能均为：16.0V，解簇电压：55.0V；S4：标准曲线的绘制，其中，所述Glu采用内标一点法测定，无标准曲线；所述三氯乙酸溶液、乙腈、“空白”血清样本或吸毒人员血清样本的体积比为1:1:1；所述涡旋设置为4000rpm、5min，离心为4℃14000rpm、10min。