[发明专利]一种红秋葵的组织培养方法

摘要

本发明公开了一种红秋葵的组织培养方法，属于植物生物技术领域。包括外植体的制备和光质处理，选取成熟、饱满的红秋葵种子，先在流水冲洗1.5‑2h，用70％酒精消毒30s，0.15％的氯化汞消毒6‑8min，无菌水冲洗5‑6次，然后在无菌水中浸泡12‑24h，然后接入1/2MS中，在白光下培养5‑7d，切取带柄子叶为外植体，接入添加了0.05mg/L NAA的MS中培养20d，然后切取两叶一心的顶芽为外植体，接入添加0.10mg/L NAA和0.05mg/L 6‑BA的MS中，然后转入蓝红绿组合光3:1:1的发光二极管(LED)光下培养，培养35d。蓝红绿组合光3:1:1的发光二极管(LED)光较适合红秋葵组培苗的生长。本发明具有操作简单、植株生长快速健壮，节省能源环保等优点，将在红秋葵离体快繁或分子育种的研究中发挥重要作用，实际应用价值高。

主权项

一种红秋葵的组织培养方法，包括以下步骤：1）外植体的制备：选取成熟、饱满的红秋葵种子，先在流水中冲洗1.5‑2h，然后在超净工作台中用70%酒精消毒30s，0.15%的氯化汞消毒6‑8min，无菌水冲洗5‑6次，然后将已经消毒的种子在无菌水中浸泡12‑24h，把消毒浸泡后的种子接入1/2MS培养基中，先在荧灯光下培养5‑7d，待子叶展平后，切取带有1.5‑2.0cm下胚轴的带柄子叶为外植体，接入添加了0.05 mg/L NAA的MS培养基中培养20d，切取由带柄子叶长出的两叶一心的顶芽为外植体；2）光质处理：然后切取由带柄子叶长出的两叶一心的顶芽接入添加0.10 mg/L NAA和0.05 mg/L 6‑BA的MS培养基中，转入蓝红绿组合光3:1:1的发光二极管（LED）光下培养，保持光强为45 μmol·m^‑2·s^‑1，光周期为12小时，湿度70±5%，培养温度24‑26℃，培养时间为35d；3）光源：所述的光照处理的光源是一组T5‑28W的发光二极管（LED）灯管，所述的光强是通过调整灯的数量和灯到植株冠层的距离来控制，所述的光周期采用一个定时装置来控制。