[发明专利]一种虎眼万年青的叶片种苗快速繁殖方法

摘要

本发明公开了一种虎眼万年青的叶片种苗快速繁殖方法，首先，在晴天选择生长健壮，无病、虫害植株的叶片，剪去不要部份，进行灭菌消毒，再将灭菌的叶片切为一定大小的块状，接种到诱导培养基上进行诱导培养，然后，将诱导培养获得的芽丛，进行分割，接种到增殖培养基上培养，获得大量小苗，最后，将增殖培养中获得的小苗，分割为单株，接种到生根培养基上进行生根培养，再选择生长健壮良好的生根苗，将培养基清洗干净，移栽到基质中，培养一段时间后，即可进行大田移栽种植。该虎眼万年青叶的组培快速繁殖方法外植体取材容易，灭菌彻底，繁殖周期短、鳞茎大，种植成活率高，非常适合应用到虎眼万年青叶繁殖中，具有一定的推广性。

主权项

一种虎眼万年青的叶片种苗快速繁殖方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)外植体的灭菌晴天选择生长健壮，无病、虫害植株的叶片，剪去不要部份，自来水下冲洗干净，在无菌工作台上，用75％的酒精浸泡20秒，然后用0.1％升汞溶液浸泡8分钟，再用无菌水冲洗5‑6次，最后用无菌纸吸去外植体表面水份；(2)外植体锈导培养将灭菌的叶片切为0.5×0.5cm大小的块状，接种到诱导培养基上，在温度：25‑27℃，光照强度：2500‑2600Lux，光照时间：每天10小时的条件下，培养60‑70天，诱导出芽丛； 培养25‑30天，切口处开始产生愈伤组织； 40‑50天分化出小芽，60‑70天形成大量芽丛； 外植体诱导分化率达90％；(3)增殖培养将诱导培养获得的芽丛，进行分割，每丛含2‑3小芽，接种到增殖培养基上，在温度：25‑27℃，光照强度：2500‑2600Lux，光照时间：每天10小时的条件下，培养30天，可获得大量小苗，实现芽丛的增殖；(4)生根培养将增殖培养中获得的高度达1cm左右的小苗，分割为单株，接种到生根培养基上，在温度：25‑27℃，光照强度：2500‑2600Lux，光照时间：每天10小时的条件下，培养30‑40天，得带鳞茎，高度达4‑5cm的生根苗，生根率达100％；(5)生根苗的移栽、驯化选择生长健壮，良好根系发达的生根苗，在清水中将培养基清洗干净，不要伤根系，用75％早基托布津2000倍液浸泡3‑5分钟，然后移栽到基质中，并保持60‑65％的空气湿度，定植50‑60天，即可进行大田移栽，其中基质的配比为：腐叶土:生红土:珍珠岩＝6:3:1；所述步骤(2)中，灭菌的叶片切为0.5×0.5cm大小的块状，接种到诱导培养基上，诱导培养基的组分及其含量为：MS+6‑BA2.5‑3.0mg.L‑1+NAA0.2‑0.25mg.L‑1+糖30g.L‑1+活性碳0.5‑1mg.L‑1+琼脂4g.L‑1，该培养基的PH为5.6‑5.8；所述步骤(3)中，将诱培养获得的芽丛进行分割，每丛含有2‑3小芽，接种到增殖培养基上，增殖培养基的组份及其含量为：MS+6‑BA1.5‑2.0mg.L‑1+NAA0.1‑0.2mg.L‑1+糖30g.L‑1+活性炭0.5‑1.0g.L‑1+琼脂4g.L‑1，该培养基的PH为5.6‑5.8；所述步骤(4)中，将增殖培养中获得的高度达1cm左右的小苗，分割为单株，接种到生根培养基上，生根培养基的组份及其含量为：MS+NAA0.4‑0.5mg.L‑1+IAA0.1‑0.2mg.L‑1+糖30g.L‑1+活性炭0.5‑1g.L‑1+琼脂4g.L‑1，该培养基PH值为5.6‑5.8。