[发明专利]一种棕点石斑鱼与清水石斑鱼的人工杂交育种方法

摘要

本发明公开了一种棕点石斑鱼与清水石斑鱼的人工杂交育种方法，包括以下步骤：(1)亲本选择、(2)亲本的培育、(3)亲鱼性腺发育程度的检查和判断、(4)人工受精、(5)受精卵的孵化、(6)受精卵的包装运输。本发明实现了棕点石斑鱼与清水石斑鱼的属间杂交，获得了兼具二种亲本特点的杂交子一代鱼的仔鱼，用于后续的人工养殖，培育出的杂交鱼养殖性能好，肉质鲜美，性价比高，为鱼类各个苗种提供了一个新的品种。

主权项

1.一种棕点石斑鱼与清水石斑鱼的人工杂交育种方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)亲本选择a.雌性亲本：选择5龄以上、体型正常、无病害、活力强的健康棕点石斑鱼作为雌性亲本；b.雄性亲本：选择5龄以上、体型正常、无病害、活力强的健康清水石斑鱼作为雄性亲本；(2)亲本的培育a.采用池塘控温培育亲本，保证二种亲本的性腺发育在时间上达到同步成熟；b.棕点石斑鱼亲鱼培育池塘的规格及水温控制：培育亲本的池塘为露天池塘，取自然水温，池塘面积1亩，水深3－3.5m，设进、排水口各1个，培育密度200－300尾/亩，雌雄比例1：1，当春季水温上升至24℃开始进入强化培育；c.清水石斑鱼亲鱼培育池塘的规格及水温控制：培育亲本的池塘须加盖保温棚，春季水温较同期的露天池塘水温高出2℃左右，池塘面积1亩，水深3－3.5m，设进、排水口各1个，培育密度150－200尾/亩，雌雄比例1：1；春季水温上升至26℃开始进入强化培育；d.日常培育的饲料种类与投喂量：二种亲本都以小鱿鱼、蓝圆鲹、鲐鱼作为主要饲料，适合的饲料鱼块长6－8cm、宽4－6cm，每天投喂饲料1次，下午投喂，每次投喂量控制在鱼体重的2％－2.5％；e.强化培育的饲料种类与投喂量：春季水温上升，当露天池塘的水温上升至24℃时，加盖保温棚的池塘水温上升至26℃左右，二种亲本同时进入强化培育阶段，二种亲本都以小鱿鱼、蓝圆鲹、鲐鱼作为饲料，每个鱼块饲料中塞入维生素E软胶囊1粒50mg投喂，每天投喂1次，日投喂量为亲鱼体重的2－3％，实际投喂量受天气、水温条件影响而有增减；(3)亲鱼性腺发育程度的检查和判断a.对亲本进行强化培育二周后，每周从亲鱼群体中挑选部分个体进行一次成熟度检查；b.棕点石斑鱼雌性亲本的检查：从棕点石斑鱼群体中选择雌性个体，置于平台上实施检查，外观上腹部隆起，生殖孔微红，即可初步判定为达到性成熟；c.清水石斑鱼雄性亲本的检查：从清水石斑鱼群体中选择雄性个体，置于平台上实施检查，在鱼腹部，用手从鱼腹部向生殖孔方向推挤，能挤出白色精液的个体即已经达到性成熟；(4)人工受精a.采精：取清水石斑鱼成熟的雄性个体，用干毛巾将鱼腹部擦干，酒精棉球对生殖孔消毒，用手在鱼体腹部，从前向生殖孔方向推挤，任乳白色的精液从生殖孔流出，用10mL注射器，将精液吸取，一尾成熟的雄性个体可取得精液3－8mL，注入试管中，备用；b.挤卵：用湿毛巾将棕点石斑鱼鱼体包裹，暴露生殖孔，操作者戴上乳胶手套，用手指插入鱼的生殖孔，将生殖孔打开，然后用手在鱼腹部从前向生殖孔方向推挤，成熟卵子即可流出，在生殖孔下方用盆接住流出的卵子；c.人工授精：向盛有卵子的盆内加入干净海水，1千克卵子加入海水10L，一边加水一边轻轻搅动，同时加入经过海水稀释的清水石斑鱼精液，加入量为每千克卵子10mL，精卵混匀之后静置3－5min，之后用干净的海水冲洗受精卵3－4遍；(5)受精卵的孵化准备一个容积500L、底部设有排水阀的孵化桶，在孵化桶内放置气石充气，将经过步骤(4)处理过的受精卵放入孵化桶中孵化，受精卵孵化条件为水温25－30℃，盐度28－33，pH7.8～8.5，孵化密度为250－300万粒受精卵/m ³，孵化过程中，发现其中有死卵或未受精卵需及时排除，每2小时换水一次，每次换水量为孵化桶容积的一半，以保持孵化桶内海水的清新；(6)受精卵的包装运输a.杂种受精卵经孵化8小时左右，胚胎发育至原肠期，即将受精卵包装、运输至育苗场，受精卵在孵化24－26小时后，即可孵出仔鱼，用于人工育苗；b.包装运输方法是用尼龙袋充氧运输法，一只70cm×40cm的尼龙袋，装上过滤海水5－8L，约占尼龙袋容积的1/4，放入受精卵100g，排除袋内空气，充进氧气并扎紧袋口，再用纸箱或泡沫塑料箱包装好，立即装上运输工具；所述步骤(4)a中，将取出的精液注入试管，密封，4℃暂存，备用，暂存的精液在一周内仍有授精能力；所述步骤(4)b中，对成熟雌性棕点石斑鱼合适的挤卵时机是农历初一至初六，人工授精操作的当天下午，提前从培育池塘中起捕棕点石斑鱼亲鱼，选择出雌性亲鱼，暂养于水泥池中，于20：00－24：00实施人工授精；所述步骤(4)c中，清水石斑鱼精液较浓密，须用海水稀释后使用，稀释的方法是：将备用的精液取出1mL，注入烧杯，加入9mL海水，晃动烧杯，将精液与海水快速混均，立即加入到已经加入海水的卵子中，从精子加入海水稀释至将稀释后的精液加入卵子中，全过程在1分钟内完成；杂种受精卵在24－25℃水温条件下，胚胎发育时间约24－26h，如果预计到达目的地之前杂种受精卵可能在运输过程中孵化出仔鱼，则不能使用受精卵运输的方式，改为运输仔鱼；所述步骤(6)中，运输受精卵，气温高时，包装箱中需加上适量冰袋降温，适宜的运输温度为24－25℃度；所述运输仔鱼的方法，步骤如下：待仔鱼全部出膜后，停止充气5～10min，仔鱼上浮到水面，死胚胎沉底，用排除死卵或未受精卵的方法将死胚胎和下层多余的水排除，从孵化桶的上层用盆小心将仔鱼取出，用尼龙袋充氧运输法，每千克受精卵孵出的仔鱼，需要包装成30袋。