[发明专利]一种用于高难接触性检材DNA提取纯化的试剂盒及方法

摘要

本发明提供一种可以有效进行高难接触性检材中DNA提取纯化的试剂盒及方法，该试剂盒由消化液、吸附液、洗涤液1、洗涤液2、洗涤液3、磁珠混悬液、洗脱液七部分组成，该试剂盒提取DNA的方法包括以下步骤：脱落细胞消化、DNA吸附、磁分离、梯度洗涤、洗脱。本发明的优势在于，提取灵敏度高，可以有效的完成高难接触性检材中DNA的提取。抗杂质干扰能力强，对含灰尘、泥土等杂质的检材提取DNA效果好，纯度高。操作简便，可以和自动化提取仪器配合使用。

主权项

一种用于高难接触性检材DNA提取纯化的试剂盒，其特征在于是由消化液、吸附液、洗涤液1、洗涤液2、洗涤液3、磁珠混悬液和洗脱液七部分组成；其中，所述的消化液的组成为异硫氰酸胍（2.0 ~ 5.0 M），盐酸胍（0.1 ~ 0.5 M），Tris HCl（0.02~0.04 M），Tween 80 （7.0×10^‑3 ~ 1.4×10^‑2 M），EDTA （2.0×10^‑3 ~ 5.0×10^‑3 M），SDS （3.0×10^‑3 ~1.5×10^‑2 M）；所述的吸附液组成为异硫氰酸胍（2.0~5.0M），Tris HCl（0.02~0.04 M），乙二醇 （1.5~ 2.5 M）；所述洗涤液1的组成为异硫氰酸胍（2.0 ~ 5.0M），Tris HCl（0.02~0.04 M），乙二醇 （3.0~ 4.0 M）；所述洗涤液2的组成为无水乙醇:异丙醇:水=7:1:2（体积比），加入NaCl至浓度为2.0 M；所述洗涤液3的组成为无水乙醇:异丙醇:水=6:2:2（体积比），加入NaCl至浓度为0.5 M；所述磁珠混悬液为尺寸100~2000nm的超顺磁性纳米磁珠，分散在高纯水中，浓度为9%（质量百分比）；所述洗脱液为高纯水。