[发明专利]马尾松病死木中失活线虫的分离液及其分离方法和试剂盒有效
申请号: | 201610025221.3 | 申请日: | 2016-01-13 |
公开(公告)号: | CN105675375B | 公开(公告)日: | 2018-09-07 |
发明(设计)人: | 王新荣;张玉焕;刘琴;余海滨;祝乐天;谢华东;贾宁;孙思;陈芳妮;茅裕婷 | 申请(专利权)人: | 华南农业大学 |
主分类号: | G01N1/34 | 分类号: | G01N1/34 |
代理公司: | 广东广信君达律师事务所 44329 | 代理人: | 张燕玲;杨晓松 |
地址: | 510642 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明属于植物样品内失活线虫的分离技术领域,公开了一种马尾松病死木中失活线虫的分离液及其分离方法和试剂盒。该分离液由pH为4.40的盐酸溶液、纤维素酶和果胶酶组成,纤维素酶和果胶酶的浓度分别为0.005和0.001mg/μl。马尾松病死木中失活线虫的分离方法按照以下步骤:将马尾松病死木材料纵切成长0.8~1.0cm,厚0.1~1mm的切片置于离心管;移取2000μl分离液于装有切片的离心管,用镊子使切片全部浸入溶液;把离心管固定在恒温振荡器中,采用50℃和250R振荡6h。本发明的分离技术,扩大了可用于检测线虫的样本来源,提高了分离效率。本发明的分离技术简单高效,可制备成试剂盒进行大规模推广。 | ||
搜索关键词: | 马尾松 病死 木中失活 线虫 分离 及其 方法 试剂盒 | ||
【主权项】:
1.一种马尾松病死木中失活线虫的分离方法,其特征在于按照以下操作步骤:(1)用手术刀片纵切马尾松病死木材料,切成长0.8~1.0cm,厚0.1~1mm的切片,用电子天平称取0.2g材料切片置于10ml离心管,并且置于‑20℃的冰箱中保存;(2)用移液枪取2000μl分离液于装有材料切片的10ml离心管,用镊子使切片全部浸入溶液;把离心管固定在恒温振荡器中,设置振荡器的参数为温度50℃、转速250R,振荡6h后,将材料切片取出,于‑20℃冰箱保存;所述分离液由pH为4.40的盐酸溶液、纤维素酶和果胶酶组成,其中纤维素酶的浓度为0.005 mg/μl,果胶酶的浓度为0.001mg/μl。
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