[发明专利]用于提高杂交瘤细胞克隆数量的添加剂及其制备方法有效
申请号: | 201610005108.9 | 申请日: | 2016-01-05 |
公开(公告)号: | CN105462934B | 公开(公告)日: | 2019-04-05 |
发明(设计)人: | 张建珍;李全;吴凡;焦守恕 | 申请(专利权)人: | 同昕生物技术(北京)有限公司 |
主分类号: | C12N5/20 | 分类号: | C12N5/20 |
代理公司: | 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司 11129 | 代理人: | 吴泳历 |
地址: | 102206 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明用于提高杂交瘤细胞克隆数量的添加剂及其制备方法,涉及免疫学研究技术,包括如下步骤:(1)获取可表达IL‑6蛋白的真核细胞的培养液上清,所述细胞培养液上清中含有表达的IL‑6蛋白;(2)对细胞培养液上清进行超滤,然后过滤除菌,获得细胞培养液上清浓缩液;(3)向细胞培养液上清浓缩液中加入亚硒酸钠,获得所述添加剂。试验数据证明,采用该添加剂之后杂交瘤细胞克隆数量可提高将近5倍。本发明还进一步提供了含有上述添加剂的杂交瘤细胞培养基。 | ||
搜索关键词: | 用于 提高 杂交瘤 细胞 克隆 数量 添加剂 及其 制备 方法 | ||
【主权项】:
1.用于提高杂交瘤克隆数量的添加剂的制备方法,包括如下步骤:(1)获取可表达IL‑6蛋白的真核细胞48小时以内的培养液上清,所述细胞培养液上清中含有表达的IL‑6蛋白;(2)用截留50KD的超滤管对细胞培养液上清进行超滤后,再用截留10KD的超滤管对滤过液进行浓缩,然后过滤除菌,获得细胞培养液上清浓缩液;(3)向细胞培养液上清浓缩液中加入亚硒酸钠至终浓度为1mg/L‑10µg/L,获得所述添加剂;所述可表达IL‑6蛋白的真核细胞选自转化有可表达IL‑6蛋白的重组表达载体的CHO细胞系。
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