[发明专利]用于测定BoNT/E在细胞中的生物活性的装置和方法

摘要

本发明涉及一种特异性结合BoNT/E切割的SNAP‑25的多克隆或单克隆抗体。此外，本发明提供一种直接测定BoNT/E在细胞中的生物活性的方法，其包括以下步骤：a)在允许BoNT/E发挥其生物活性的时间和条件下用BoNT/E温育对BoNT/E中毒敏感的细胞；b)固定所述细胞，并且任选地用洗涤剂使所述细胞透化；c)使所述细胞至少与特异性结合非切割的和BoNT/E切割的SNAP‑25的第一捕获抗体以及至少与特异性结合BoNT/E切割的SNAP‑25的第二捕获抗体在允许所述捕获抗体与指定底物结合的条件下接触，其中所述第二捕获抗体是本发明的抗体；d)使所述细胞至少与特异性结合所述第一捕获抗体的第一检测抗体在允许所述第一检测抗体与所述第一捕获抗体结合的条件下接触，因而形成第一检测复合物，以及至少与特异性结合所述第二捕获抗体的第二检测抗体在允许所述第二检测抗体与所述第二捕获抗体结合的条件下接触，因而形成第二检测复合物，并且其中所述第一检测抗体不同于所述第二检测抗体；e)测定步骤d)的所述第一检测复合物和第二检测复合物的量；和f)借助于所述第二检测复合物来计算在所述细胞中通过BoNT/E切割的SNAP‑25的量，从而测定BoNT/E在所述细胞中的生物活性。此外，本发明涉及一种用于执行本发明的方法的试剂盒。