[发明专利]用于产生对草甘膦除草剂具有抗性的植物的组合物和方法

摘要

本公开包括对膦酰基甲基甘氨酸家族的除草剂，例如草甘膦具有抗性的突变植物的产生。提供了用于编辑细胞中的感兴趣的核苷酸序列的组合物和方法，其采用向导多核苷酸/Cas内切核酸酶系统，其中Cas内切核酸酶通过向导多核苷酸引导以识别且任选地向细胞的基因组中的特定靶位点处引入双链断裂。待编辑的感兴趣的核苷酸序列可位于由Cas内切核酸酶识别的靶位点之内或之外。更具体地，提供了用于编辑细胞中的烯醇式丙酮基莽草酸‑3‑磷酸合酶(EPSPS)核苷酸序列的组合物和方法。所述方法和组合物采用向导多核苷酸/Cas内切核酸酶系统来提供用于编辑细胞基因组内的EPSPS核苷酸序列的有效系统。还提供了用于产生草甘膦耐受性植物细胞、植物外植体、种子和谷粒的组合物和方法。

主权项

一种用于产生烯醇式丙酮基莽草酸‑3‑磷酸合酶(EPSPS)突变植物的方法，所述方法包括：a)向包含EPSPS核苷酸序列的植物细胞提供向导RNA、多核苷酸修饰模板和Cas内切核酸酶，其中所述向导RNA和Cas内切核酸酶能够形成复合物，所述复合物使所述Cas内切核酸酶能够在所述植物细胞的基因组中的靶位点处引入双链断裂，其中所述多核苷酸修饰模板包含所述EPSPS核苷酸序列的至少一个核苷酸修饰；b)由(a)的植物细胞获得植物；c)评估(b)的植物中是否存在所述至少一个核苷酸修饰；以及d)选择表现出草甘膦抗性的子代植物。