[发明专利]通过TALEN平台技术的甜菜原生质体的转化方法在审
| 申请号： | 201580031432.1 | 申请日： | 2015-06-12 |
| 公开（公告）号： | CN106715697A | 公开（公告）日： | 2017-05-24 |
| 发明（设计）人： | 盖伊·魏恩斯;马克·勒菲弗;夏夫高达·塔姆曼纳高达;米里耶勒·隆梅尔;罗松 | 申请（专利权）人： | 西斯凡德尔哈维公众公司 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;A01H5/00 |
| 代理公司： | 北京康信知识产权代理有限责任公司11240 | 代理人： | 张英,宫传芝 |
| 地址： | 比利*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | 用于转化甜菜原生质体的方法，包括以下步骤‑从分离自甜菜植物的气孔保卫细胞获得原生质体，‑用包含感兴趣的核苷酸序列和转录激活子样效应子核酸酶(TALEN)或者包含编码这些转录激活子样效应子核酸酶(TALEN)序列的序列的一种或多种载体的核酸构建体转化所述原生质体，其中这些TALEN靶向并加工靶序列，并通过同源重组用包含所述感兴趣的核苷酸序列的核酸构建体替换所述靶序列，‑可能地，向这些原生质体的体外培养物应用对所述原生质体的体外培养物有毒的，优选地致死的培养基，和‑从细胞培养物再生甜菜植物，优选地，从整合了包含感兴趣的序列的核酸构建体的存活的原生质体再生甜菜植物，所述感兴趣的序列可能使所述转化的细胞对所应用的培养基的毒性活性具有耐受性。 | ||
| 搜索关键词： | 通过 talen 平台 技术 甜菜 原生 质体 转化 方法 | ||
【主权项】：
一种用于转化甜菜原生质体的方法，包括以下步骤：‑从分离自甜菜植物的气孔保卫细胞获得原生质体，‑用包含感兴趣的核苷酸序列和转录激活子样效应子核酸酶(TALEN)序列或者包含编码所述转录激活子样效应子核酸酶(TALEN)序列的序列的一种或多种载体的核酸构建体转化所述原生质体，其中所述转录激活子样效应子核酸酶靶向并处理所述原生质体的靶序列，并且通过同源重组用包含感兴趣的所述核苷酸序列的核酸构建体替换所述靶序列，‑可能地，向所述原生质体的体外培养物应用对所述原生质体的体外培养物有毒的培养基，和‑从所述原生质体培养物再生甜菜植物，优选地，从整合了包含感兴趣的序列的核酸构建体的存活的原生质体再生甜菜植物，感兴趣的所述序列可能使转化的所述原生质体对所应用的培养基的毒性活性具有耐受性。
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