[发明专利]一种产L-氨基酸的重组菌、其构建方法及L-氨基酸生产方法

摘要

提供了一种产L‑氨基酸的重组菌、其构建方法及L‑氨基酸生产方法。该产L‑氨基酸的重组菌相比于出发菌具有降低的6‑磷酸葡萄糖异构酶Pgi的表达，和提高的6‑磷酸葡萄糖脱氢酶Zwf‑OpcA的表达，其中该出发菌是能够累积目的氨基酸的菌株。发酵培养该重组菌可显著提高L‑氨基酸的产量。还提供了新的提高L‑氨基酸的发酵产量的方法，可用于细菌发酵生产L‑氨基酸。

主权项

1.一种产L‑氨基酸的重组菌，所述重组菌相比于出发菌具有降低的6‑磷酸葡萄糖异构酶Pgi的表达，和提高的6‑磷酸葡萄糖脱氢酶Zwf‑OpcA的表达，其中所述出发菌是能够累积目的氨基酸的菌株，所述目的氨基酸是L‑组氨酸；其中，所述出发菌相对于原始菌具有增强的L‑组氨酸合成操纵子hisEG基因和hisDCB基因的表达，以P_glyA启动子代替所述hisEG基因和hisDCB基因的启动子；所述出发菌相比于原始菌具有增强的PRPP合成酶PrsA的表达；所述出发菌相对于原始菌的hisE和hisD基因的RBS替换为谷氨酸棒杆菌高表达基因的保守RBS序列，hisE基因的起始密码子GTG替换为高表达强度的ATG；所述出发菌相对于原始菌的hisG基因的N215K/L231F/T235A点突变为将hisG基因编码的ATP‑磷酸核糖转移酶的第215位天冬酰胺变为赖氨酸、第231位亮氨酸变为苯丙氨酸和第235位苏氨酸变为丙氨酸。