[发明专利]一种生物素化无机焦磷酸酶的表达方法有效
| 申请号： | 201511024977.8 | 申请日： | 2015-12-30 |
| 公开（公告）号： | CN105400749B | 公开（公告）日： | 2017-05-31 |
| 发明（设计）人： | 高静;蔡亦梅;吴超;徐潇;张睿;王者馥;王绪敏;殷金龙;任鲁风 | 申请（专利权）人： | 北京中科紫鑫科技有限责任公司 |
| 主分类号： | C12N9/14 | 分类号： | C12N9/14;C12N15/70 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 101111 北京市大兴区经济技术*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种生物素化无机焦磷酸酶的表达方法，其中使用一种由23个氨基酸残基组成的生物素受体蛋白BAP23，将BAP23的编码基因构建到大肠杆菌表达载体中后，获得重组表达载体，当无机焦磷酸酶编码基因插入到上述重组表达载体中后，表达的融合蛋白能够在大肠杆菌细胞内被生物素化修饰。按照本发明提供的表达方法表达的生物素化无机焦磷酸酶的产量达到21～38mg/100mL培养基；比活力达到94.2～151.6U/mg。表达的生物素化无机焦磷酸酶被磁珠固定后得到的Bead‑LUC被反复洗涤3次后，催化活力几乎不受影响；被反复洗涤15次后，仍能够维持相较于洗涤前91％以上的相对活力。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 生物素 无机 磷酸酶 表达 方法 | ||
【主权项】：
一种生物素化无机焦磷酸酶的表达方法，其特征在于：所述表达方法使用一种由23个氨基酸残基组成的生物素受体蛋白BAP23，将该生物素受体蛋白的编码基因构建到大肠杆菌表达载体中，获得一种携带上述生物素受体蛋白编码基因的重组表达载体，当无机焦磷酸酶的编码基因构建到上述重组表达载体中后，能够表达该生物素受体蛋白和无机焦磷酸酶的融合蛋白，该融合蛋白能够在大肠杆菌细胞内被生物素化修饰；其中，所述的生物素受体蛋白BAP23的序列为SEQIDNO：1所示的氨基酸序列。
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