[发明专利]一种优良食味、抗稻瘟病水稻品种的聚合育种方法

摘要

本发明公开了一种优良食味、抗稻瘟病水稻品种的聚合育种方法，选用武粳13与关东194杂交配组；再利用F1与武粳15复交，F2和F3代单株混收，并对其进行暗胚乳突变基因和抗稻瘟病基因的分子标记辅助选择，获得暗胚乳突变基因型为Wx‑mqWx‑mq、稻瘟病抗性基因型为Pi‑taPi‑ta 和Pi‑bPi‑b的三基因纯合体；后续世代经产量与农艺性状选择，至F7代选育出农艺性状稳定一致、优良食味、抗稻瘟病的高产水稻。该水稻不仅产量高，抗水稻稻瘟病、条纹叶枯病，综合了糯米的柔性和粳米的弹性，食味品质极佳，在江苏省淮北和苏中地区中上等肥力条件下种植，具有广阔的应用前景。

主权项

一种优良食味、抗稻瘟病病水稻品种的聚合育种方法，其特征在于，包括以下步骤：1)选用Wx位点上基因型为Wx‑bWx‑b，稻瘟病感病基因型为Pi‑bPi‑b的江苏高产粳稻品种武粳13为母本♀与具有暗胚乳突变基因，暗胚乳突变基因型为Wx‑mqWx‑mq，稻瘟病感病基因型为pi‑tapi‑ta和pi‑bpi‑b的日本优质粳稻品种关东194为父本♂杂交配组，获得第一代种子；2)利用第一代种子与高抗稻瘟病品种武粳15复交，种植F1、F2、F3，成熟后全部单株混收；武粳15的稻瘟病感病基因型为Pi‑taPi‑ta和Pi‑bPi‑b，其中Wx‑mq、pi‑ta、pi‑b相对于Wx‑b、Pi‑ta、Pi‑b为隐性遗传；3)F2代开始进行水稻暗胚乳突变基因和稻瘟病抗性基因的分子标记辅助选择，苗期各单株DNA的提取采用SDS法，扩增水稻品种的基因组DNA并经溴化乙锭染色后观察，选择具有439bp和292bp两条特征条带的Wx‑mq基因纯合体单株备用，分别选择具有1024bp和365bp特征条带的含Pi‑ta、Pi‑b基因纯合体单株备用；4)将F2代中同时含有Wx‑mq基因纯合体和Pi‑ta、Pi‑b基因的纯合体和杂合体单株分别种成F3小区，利用分子标记对稻瘟病免疫或高抗的小区继续进行检测，选择所有单株均同时具有439bp、292bp、1024bp和365bp特征条带的小区，于F7获得优良食味、抗稻瘟病水稻品种；步骤3)中，水稻暗胚乳突变基因Wx‑mq的分子检测，采用的四引物PCR标记引物为：正向外引物Wx‑mq‑O‑F序列为5'‑ATGTTGTGTTCTTGTGTTCTTTGCAGGC‑3'，反向外引物Wx‑mq‑O‑R序列为5'‑GTAGATCTTCTCACCGGTCTTTCCCCAA‑3'，正向内引物Wx‑mq‑I‑F序列为5'‑GGGTGAGGTTTTTCCATTGCTACAATCG‑3'，反向内引物Wx‑mq‑I‑R序列为5'‑GTCGATGAACACACGGTCGACTCAAT‑3'；步骤3)中，稻瘟病抗性基因Pi‑ta、Pi‑b的分子检测，采用多重PCR分子标记引物；对抗病基因Pi‑ta进行检测所采用的引物包括：正向引物：5'‑AGCAGGTTATAAGCTAGGCC‑3'和反向引物：5'‑CTACCAACAAGTTCATCAAA‑3'；对抗病基因Pi‑b进行检测所采用的引物包括：正向引物：5'‑GAACAATGCCCAAACTTGAG‑3'和反向引物：5'‑GGGTCCACATGTCAGTGAGC‑3'。