[发明专利]一种抗手足口病特异性纳米抗体及其效价测定方法在审
申请号: | 201510915897.5 | 申请日: | 2015-12-11 |
公开(公告)号: | CN105367655A | 公开(公告)日: | 2016-03-02 |
发明(设计)人: | 赵肃清;秦静;崔锡平;沈定;吕瑞;梁雨昕 | 申请(专利权)人: | 广东工业大学 |
主分类号: | C07K16/10 | 分类号: | C07K16/10;C07K16/06;G01N33/543 |
代理公司: | 广州市越秀区海心联合专利代理事务所(普通合伙) 44295 | 代理人: | 王海曼 |
地址: | 510006 广东省广州市番禺区广州大*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种抗手足口病特异性纳米抗体及其效价测定方法,旨在提供一种分子量小、水溶性好、特异性强、稳定性高的抗手足口病特异性纳米抗及其效价测定方法体;其技术要点:所述抗手足口病特异性纳米抗体依次通过下述步骤制得:1)采用灭活纯化的EV71型病毒株制成可溶性抗原;2)用0.01M的磷酸盐缓冲液将步骤1)制备的可溶性抗原配成0.8-1.2mg/ml抗原液,与弗氏完全佐剂按体积比1:0.8-1.2充分乳化后制得免疫抗原;3)采用步骤2)制备的免疫抗原多点注射双峰骆驼背部皮下,平均500-700μL/只,免疫周期为12-18天,中间加强免疫3次,采用初免相同免疫方法和剂量,免疫4个周期后,静脉取血,收集血清,3-5℃冰箱保存备用;4)将收集到的血清,通过PEG三步沉淀法和改进水体综合PEG法进行纯化,得到纳米抗体;属于免疫学技术领域。 | ||
搜索关键词: | 一种 手足 特异性 纳米 抗体 及其 测定 方法 | ||
【主权项】:
一种抗手足口病特异性纳米抗体,其特征在于,所述的抗手足口病特异性纳米抗体依次通过下述步骤制得:1)采用灭活纯化的EV71型病毒株制成可溶性抗原;2)用0.01M的磷酸盐缓冲液将步骤1)制备的可溶性抗原配成0.8‑1.2mg/ml抗原液,与弗氏完全佐剂按体积比1:0.8‑1.2充分乳化后制得免疫抗原;3)采用步骤2)制备的免疫抗原多点注射双峰骆驼背部皮下,平均500‑700μL/只,免疫周期为12‑18天,中间加强免疫3次,采用初免相同免疫方法和剂量,免疫4个周期后,静脉取血,收集血清,3‑5℃冰箱保存备用;4)将收集到的血清,通过PEG三步沉淀法和改进水体综合PEG法进行纯化,得到纳米抗体。
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