[发明专利]乳粉中低聚半乳糖的高效液相色谱串联质谱检测方法

摘要

乳粉中低聚半乳糖的高效液相色谱串联质谱检测方法，涉及乳粉中低聚半乳糖的定量检测，其包括步骤(1)制备标准溶液并进行高效液相色谱串联质谱检测，得不同浓度的混合标准溶液的标准谱图；(2)将步骤1获得的标准谱图按棉籽糖、水苏糖、毛蕊花糖分别制作浓度与色谱峰面积关系曲线图；(3)乳粉样品的预处理及高效液相色谱串联质谱检测；(4)样品中的棉籽糖、水苏糖、毛蕊花糖的含量的确定，将步骤3获得的样品谱图的保留时间确定低聚半乳糖品种并将其色谱峰面积代入步骤2对应的低聚半乳糖品种的标准曲线方程，计算样品中各种低聚半乳糖的含量。本发明具有前处理过程简单，检测速度快，检测结果准确、灵敏度高的特点。

主权项

乳粉中低聚半乳糖的高效液相色谱串联质谱检测方法，其特征在于包括以下步骤：(1)制备标准溶液并进行高效液相色谱串联质谱检测称取各种低聚半乳糖标准品并将其配成混合标准储备液；再将混合标准储备液用蒸馏水逐级稀释，分别配成至少5种不同浓度的混合标准溶液，将不同浓度的混合标准溶液进行高效液相色谱串联质谱检测并得到标准谱图，标准谱图中保留时间确定低聚半乳糖品种，色谱峰面积与对应的低聚半乳糖浓度成函数关系；(2)将步骤(1)获得的标准谱图按低聚半乳糖品种分别制作浓度与色谱峰面积关系曲线图；(3)乳粉样品进行预处理及高效液相色谱串联质谱检测；称取乳粉样品，加入蒸馏水和无水乙醇溶解，涡旋振荡后，超声溶解，离心，取上清液稀释后过滤膜过滤，取滤液进行高效液相色谱串联质谱检测，得乳粉样品谱图；(4)样品中的低聚半乳糖的含量的确定将步骤(3)获得的样品谱图的保留时间确定低聚半乳糖品种并将其色谱峰面积代入步骤(2)对应的低聚半乳糖品种的标准曲线方程，计算样品中各种低聚半乳糖的含量；其中所述高效液相色谱串联质谱的实验条件如下：色谱条件：①色谱柱选用XBridgeTM Amide，3.5μm，4.6×150mm，进样量为5μL，柱温为40℃，流速为0.4mL·min‑1；②流动相和洗脱程序如下：流动相A为40/60乙腈/水的混合溶液，混合溶液中含0.10％氨水；流动相B：70/30乙腈/水的混合溶液，混合溶液中含0.10％氨水；0～0min，流动相A从0到40％，流动相B从100％到60％；30～33min，流动相A从40％到60％，流动相B从60％到40％；33～35min，流动相A保持60％，流动相B保持40％；35～37min，流动相A从60％到0，流动相B从40％到100％；质谱条件：离子化方式为电喷雾电离；扫描方式为负离子扫描；检测方式为多反应监测。