[发明专利]一种提高转基因鸡孵化率的方法及使用的蛋壳开口器

摘要

本发明公开了一种提高转基因鸡孵化率的方法及使用的蛋壳开口器，该方法包括以下步骤：(1)孵化器的消毒及种蛋的预孵化处理；(2)种蛋的开口；(3)外源基因的注射；(4)种蛋的封口。本发明采用专用蛋壳开口器对蛋壳赤道面进行开口时，一边用蛋壳开孔器的磨轮表面轻轻研磨开口部位，一边用酒精棉球擦拭蛋壳碎末，直至蛋壳赤道面上出现开口。同时本发明采用蛋清+蛋壳膜封口处理，将开口与封口相结合，显著提高了鸡胚孵化率，采用本发明的转染方法，转基因鸡的孵化率可达到56.4％。

主权项

一种提高转基因鸡孵化率的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)孵化器的消毒及种蛋的预孵化处理对孵化器进行消毒，种蛋进行预孵化处理，放入孵化箱内开始孵化；1‑18d的孵化温度为37.8℃，湿度为60％，19‑21d的孵化温度为37℃，湿度为78％；(2)种蛋的开口开口前将蛋壳开口器和无菌操作台进行消毒，将孵化12‑24h的种蛋从孵化箱内取出，在种蛋的赤道位置先用碘酊后用75％酒精擦拭消毒，用砂轮在蛋壳赤道面处研磨，一边研磨一边用酒精棉球擦拭蛋壳碎末，直至蛋壳赤道面上出现开口，观察鸡胚孵育情况；(3)外源基因的注射将开口后的鸡蛋，开口向上，放在操作台内静置2min，使鸡胚盘的位置漂浮在鸡蛋的开口处，将含有外源基因的转染液注射入鸡的胚盘中，用抗生素对开口处进行杀菌；(4)种蛋的封口种蛋的封口采用蛋清+蛋壳膜封口的方法，封口后放入孵化箱继续孵化；其中蛋清+蛋壳膜封口的方法为：将蛋壳膜在蛋清中润洗，然后在开口处覆盖第一层蛋壳膜，再在第一层蛋壳膜上交叉覆盖第二层蛋壳膜。