[发明专利]一种ELISA试剂盒抗原间接包被酶标板的包被方法有效
| 申请号： | 201510691100.8 | 申请日： | 2015-10-22 |
| 公开（公告）号： | CN105388282B | 公开（公告）日： | 2017-08-01 |
| 发明（设计）人： | 卢曾军;付元芳;曹轶梅;孙普;白兴文;李平花;包慧芳;李冬;陈应理;刘在新 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
| 主分类号： | G01N33/543 | 分类号： | G01N33/543 |
| 代理公司： | 北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司11385 | 代理人： | 董芙蓉 |
| 地址： | 730046 甘肃*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | 一种ELISA试剂盒抗原间接包被酶标板的包被方法，包括以下步骤(1)包被；(2)封闭采用10g/L鱼明胶的0.01mol/L PBS缓冲液封闭；(3)捕获目标抗原；(4)加含5％蔗糖和1～5％牛血清白蛋白的0.01mol/L，pH 7.2～7.6磷酸盐缓冲液的固相抗原稳定剂，抽干，即得抗原间接包被酶标板。本发明包被得到的酶标板保存期可达1年以上，显著提高了抗原间接包被ELISA试剂盒的稳定性与保存期。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 elisa 试剂盒 抗原 间接 包被 酶标板 方法 | ||
【主权项】：
一种ELISA试剂盒抗原间接包被酶标板的包被方法，其特征在于，(1)包被：用0.05mol/L pH 9.6碳酸盐缓冲液稀释单克隆抗体或多克隆抗体至工作浓度1～2μg/mL，加入酶标板，每孔加95～105μL，室温下包被过夜，然后用PBS洗3次；(2)封闭：每孔加含10g/L鱼明胶的0.01mol/L PBS缓冲液95～105μL，35～38℃封闭1～2h，然后用PBS洗涤3次；(3)捕获目标抗原：用0.01mol/L PBS缓冲液稀释目标抗原至工作浓度0.5～1.5μg/mL，每孔95～105μL加入酶标板，18～25℃捕获反应1～1.5h，然后用PBS洗涤3次；(4)加固相抗原稳定剂：在酶标板孔湿润的状况下，每孔加入120～150μL固相抗原稳定剂，室温作用20～40min，弃残液；酶标板置于室温、湿度20％～30％的洁净空间，抽湿机抽干10～12小时，即得抗原间接包被酶标板；其中，所述固相抗原稳定剂是由质量分数5％的蔗糖和质量分数1％牛血清白蛋白0.01mol/L，pH 7.5的磷酸盐缓冲液，加入质量分数0.1％硫柳汞防腐剂，37℃放置4周制成。
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