[发明专利]人嗅粘膜嗅鞘细胞分离、传代、冻存、分化技术

摘要

本发明提供了人嗅粘膜嗅鞘细胞培养、传代、冻存、分化技术。特色步骤包括：1、用含DMEM/DF12等神经营养因子配制嗅粘膜嗅鞘细胞培养基；2、鼻粘膜的获取；3、双酶组合消化。4、原代培养：加入嗅粘膜嗅鞘细胞培养基制成的细胞悬液，转移细胞到培养瓶中，在CO2恒温恒湿培养箱培养；5、传代培养：收集过滤培养基上清液，配制传代培养基；6、超低温冻存：收集过滤培养基上清液，配制专用冻存液；7、应用前分化培养。本发明选取人上鼻甲嗅区粘膜进行培养增殖、传代、冻存、分化，能获得高纯度嗅粘膜嗅鞘细胞，该细胞具有综合神经修复作用，临床治疗研究显示，这种细胞能有效修复神经疾病和损害丧失的神经功能并改善患者的生存质量。

主权项

按照权利要求 1 所述人嗅粘膜嗅鞘细胞分离、传代、冻存、分化技术，其特征在于 ：所述步骤 1 中配制人嗅粘膜嗅鞘细胞基础培养基的步骤为 ：A：用DMEM/DF12(Gibco)、20ng/mlEGF(Pepro Tech)、20ng/mlFGF（Pepro Tech）、1%N2（Gibco）、2%B27（Gibco）、T3(Sigma)按比例配制获得人嗅粘膜嗅鞘细胞培养基； B： 层流细胞培养室过滤除菌，4℃储存备用。