[发明专利]一种建立人胚胎干细胞向嗜酸性粒细胞分化模型的方法在审
| 申请号： | 201510330014.4 | 申请日： | 2015-06-15 |
| 公开（公告）号： | CN104911149A | 公开（公告）日： | 2015-09-16 |
| 发明（设计）人： | 马峰 | 申请（专利权）人： | 中国医学科学院输血研究所 |
| 主分类号： | C12N5/0787 | 分类号： | C12N5/0787;C12N5/0735 |
| 代理公司： | 四川君士达律师事务所 51216 | 代理人： | 芶忠义 |
| 地址： | 610052 四川省成*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 一种建立人胚胎干细胞向成熟嗜酸性粒细胞定向分化模型的方法，包括：hESCs H1细胞株维持未分化培养；mAGM-S3基质细胞的准备；H1细胞株与mAGM-S3共培养产生造血干/祖细胞；造血干/祖细胞的液体悬浮培养；共培养及悬浮培养得到的细胞进行流式细胞学表面分子检测；选取无基质细胞培养条件下的H1细胞株未分化集落与经13.3GrayX射线照射的小鼠基质细胞AGM-S3共培养，获得多能造血干/祖细胞，悬浮培养，定向诱导分化为成熟嗜酸性粒细胞。之后进行计数、甩片、May-Giemsa染色观察细胞形态、免疫荧光染色观察Eos细胞内颗粒蛋白的表达、流式细胞学检测细胞表面分子的表达和进行功能实验。利用本方法能显著提高嗜酸性粒细胞体外诱导分化的效率。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 建立 胚胎 干细胞 酸性 粒细胞 分化 模型 方法 | ||
【主权项】：
一种建立人胚胎干细胞向嗜酸性粒细胞定向分化模型的方法，其特征在于，将培养未分化的hESCs与经13.3Gray X射线辐照处理后的mAGM‑S3细胞共培养3天后，加入造血诱导分化液经一定条件培养得到造血干/祖细胞，将造血干/祖细胞扩增后，利用细胞因子培养液使造血干/祖细胞进入嗜酸性粒细胞诱导分化阶段，持续培养后更换细胞因子培养液使嗜酸性粒细胞趋于成熟，之后检测确定成熟嗜酸性粒细胞纯度和功能。
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