[发明专利]一种从双孢蘑菇预煮液中提取纯化双孢蘑菇多糖的方法

摘要

本发明公开了一种从双孢蘑菇预煮液中提取纯化双孢蘑菇多糖的方法，通过冷冻结晶、过滤、醇沉和热醇过滤的方法从罐头企业副产品双孢蘑菇预煮液的浓缩液中分离出蘑菇粗多糖，再通过HZ‑830酸性离子交换树脂和D303碱性离子交换树脂两种离子交换树脂柱的串联纯化技术对得到的双孢蘑菇粗多糖进行纯化精制，从而获得精制的双孢蘑菇多糖。本发明操作简单快速，能够同时脱除蛋白和色素杂质，两类杂质的最终脱除率都大于90%，多糖保留率大于70%，整个过程除乙醇以外不使用其它有机溶剂，具有安全、高效和环保的优点。

主权项

一种从双孢蘑菇预煮液中提取纯化双孢蘑菇多糖的方法，其特征在于：其包括以下步骤：第一步：提取双孢蘑菇粗多糖1）结晶过滤：将双孢蘑菇加工过程中产生的双孢蘑菇预煮液浓缩至密度为1.5g/mL以上，得到双孢蘑菇预煮液浓缩液，并在4℃冷藏24‑72 小时后，过滤去除结晶沉淀物，回收滤液，备用；2）醇沉过滤：向上述滤液中添加3‑3.5倍体积的95%乙醇，沉淀20‑24小时后，水浴加热醇沉液至50℃后，趁热过滤取沉淀物，将沉淀物中的乙醇挥发即得到双孢蘑菇粗多糖；第二步：阴、阳离子交换树脂串联纯化双孢蘑菇粗多糖1）树脂柱准备：将HZ‑830酸性离子交换树脂柱和D303碱性离子交换树脂柱串联，HZ‑830酸性离子交换树脂柱出液端连接D303碱性离子交换树脂柱进液端，两种树脂等体积装柱，根据交换柱规格计算单柱体积BV，串联柱体积2BV；2）上样：将上述双孢蘑菇粗多糖用纯水复溶为浓度为20‑30mg/mL的双孢蘑菇粗多糖溶液，调节pH至7‑8，通过恒流泵以2BV/h 的流速往HZ‑830酸性离子交换树脂的进液端泵入样品，控制泵入样品总体积为5BV；3）回收：在D303碱性离子交换树脂的出液端收集样品，上样结束后以1BV蒸馏水2BV/h流速洗脱并回收洗脱液，与样品合并，将合并后的样品通过旋转蒸发浓缩10倍后，加入4‑4.5倍体积95%乙醇, 沉淀20‑24小时后，过滤取沉淀，再将沉淀至于50‑60℃真空干燥2‑3小时，即得到精制的双孢蘑菇多糖。