[发明专利]一种烟草中糖苷键合态香味成分的测定方法

摘要

本发明公开了一种烟草中糖苷键合态香味成分的测定方法，是将烟叶干燥后粉碎并过筛，依次经粗提和精提后得到烟草糖苷精提物，在烟草糖苷精提物中加入内标溶液，N₂吹干后加入衍生化溶剂和酰化试剂进行衍生化，得到烟草糖苷衍生化产物；随后利用气相色谱-质谱联用对烟草糖苷衍生化产物进行分析。本发明不仅能对烟草中糖苷键合态香味成分进行完全的提取，而且能对其进行有效的分离和纯化；同时，利用衍生化以及气质联用方法分析，能够全面、准确地对烟草中糖苷键和态香味成分进行定性和定量分析。

主权项

一种烟草中糖苷键合态香味成分的测定方法，其特征在于包括以下步骤：(1)提取：将烟叶干燥粉碎后过40目筛得烟末，称取1g烟末放入容器中，加入20‑50mL提取溶剂，提取糖苷键和态香味成分，取上清液过滤后，减压蒸干溶剂得到烟草糖苷粗提物；(2)分离纯化：将步骤(1)得到的烟草糖苷粗提物溶于10mL去离子水中，加到固相萃取柱上，以0.5mL/min的流速通过固相萃取柱；再依次用20mL超纯水、15mL正戊烷/二氯甲烷(体积比2:1)洗脱，洗脱速度≤1.0mL/min；最后用20mL甲醇洗脱，洗脱速度为2.0mL/min，收集甲醇洗脱液，浓缩至干得到烟草糖苷精提物；(3)衍生化：向步骤(2)得到的烟草糖苷精提物中加入内标溶液1mL，N₂吹干，加入400μL衍生化溶剂和400μL酰化试剂，密封后于50‑80℃水浴衍生化反应60min，冷却至室温，得到烟草糖苷衍生化产物。(4)分析：对烟草糖苷衍生化产物进行气质联用分析。