[发明专利]蛋白聚糖酶抑制剂结合体外交联透明质酸水凝胶的制作方法及在治疗骨关节炎药物中的应用

摘要

本发明公开了一种蛋白聚糖酶抑制剂结合体外交联透明质酸水凝胶的制作方法及在治疗骨关节炎药物中的应用，该方法包括透明质酸醛基修饰，透明质酸己二酸二酰肼修饰和透明质酸体外交联；本发明所述蛋白聚糖酶抑制剂结合体外交联透明质酸水凝胶具有缓释药物的性能，能有效缓解大鼠骨性关节炎，促进大鼠骨性关节炎膝蛋白聚糖的表达和抑制蛋白聚糖降解产物的表达。本发明结合生物材料和药物，通过组织工程手段治疗骨关节炎，利用关节腔给药方式，减少了骨关节炎治疗的创伤；缓释给药的给药途径，可以在提高局部药物浓度的同时减少全身用药产生相应的副作用。

主权项

蛋白聚糖酶抑制剂结合体外交联透明质酸水凝胶的制作方法，其特征在于，该方法具体包括以下步骤：步骤一：透明质酸醛基修饰将60mg的透明质酸先溶解在20ml的双蒸水内，然后再加入218μl浓度为10 mg/mL的NaIO₄，在室温下反应两个小时；然后加入0.2ml的己二醇搅拌1小时来终止反应，得到的混合物在水中透析三天；将得到的醛基修饰的透明质酸冻干再储存在4℃的温度下；步骤二：透明质酸己二酸二酰肼修饰；将至少30倍摩尔浓度的己二酸二酰肼加入到3 mg/mL的HA中，然后把pH调整到6.8；在混合物中加入1 mol/L的二氯乙烷和1 mol/L的三氮唑，保持pH为6.8使其反应4小时；再通过调整pH到7.0将反应停止，得到的混合物在水中透析三天，将得到的己二酸二酰肼修饰的透明质酸冻干再储存在4℃的温度下；步骤三：透明质酸体外交联；将0.6mg的ADAMTS‑5抑制剂和50ul的醛基修饰的透明质酸混合，再将混合液与50ul的己二酸二酰肼修饰的透明质酸混合，反应1分钟内成凝胶状。