[发明专利]一种高产肌苷菌株的选育方法在审
| 申请号： | 201510287834.X | 申请日： | 2015-05-29 |
| 公开（公告）号： | CN106282155A | 公开（公告）日： | 2017-01-04 |
| 发明（设计）人： | 彭日荷;姚泉洪;王荣谈;田永生;王丽娟;丁卫星;严培兰;王波;孙斌 | 申请（专利权）人： | 上海瑞丰农业科技有限公司;上海市农业科学院 |
| 主分类号： | C12N13/00 | 分类号： | C12N13/00;C12N15/01;C12N15/03;C12R1/125 |
| 代理公司： | 上海开祺知识产权代理有限公司31114 | 代理人： | 费开逵,崔兆慧 |
| 地址： | 201106 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种高产肌苷菌株的选育方法，包括以下步骤：利用紫外光照射出发菌株，采用梯度平板法从中筛选出抗生素和磺胺胍抗性双抗菌株，对双抗菌株进行摇瓶发酵获取产肌苷能力提高的菌株；利用基因组重排方法将两种或两种以上不同抗生素抗性菌株原生质融合，筛选出多种抗生素抗性菌株，再通过摇瓶发酵筛选出高产肌苷菌株。本发明大幅度提高了枯草芽孢杆菌肌苷产量，同时保持了菌株的优良特性。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 高产 菌株 选育 方法 | ||
【主权项】：
一种高产肌苷菌株的选育方法，其特征在于，包括以下步骤：1)利用紫外光照射出发菌株，采用梯度平板法从中筛选出抗生素和磺胺胍抗性双抗菌株，对双抗菌株进行摇瓶发酵筛选出产肌苷能力提高的菌株：将出发菌株接种到种子培养液30～45℃培养19～30h后，离心，清洗后再悬浮，取菌液和抗生素溶液等体积混合，紫外灯照射，30～45℃离心处理，之后立即用生理盐水稀释终止反应；取稀释后的菌液涂布于含有磺胺胍和抗生素溶液的营养琼脂平板上，30～45℃培养19～30h，观察不同平板上的菌落生长情况，采用梯度平板法筛选出抗生素和磺胺胍抗性双抗菌株，再经过若干轮筛选得到磺胺胍抗性提高的双抗菌株；再通过摇瓶发酵进行初筛和复筛，筛选出产肌苷能力提高的菌株，且该菌株磺胺胍抗性和肌苷产量形状的遗传表现稳定；2)选取不同的抗生素溶液，重复步骤(1)，得到产肌苷能力提高的不同抗生素抗性菌株；3)利用基因组重排方法将得到的两种或两种以上不同抗生素抗性菌株原生质融合，筛选出多种抗生素抗性菌株；再通过摇瓶发酵从多种抗生素抗性菌株中筛选出产肌苷能力提高的菌株即高产肌苷菌株。
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