[发明专利]酶标抗体‑金纳米探针在二氨基联苯胺催化显色及暗场成像的应用有效
| 申请号： | 201510243543.0 | 申请日： | 2015-05-13 |
| 公开（公告）号： | CN104849449B | 公开（公告）日： | 2017-04-05 |
| 发明（设计）人： | 张宇;范霖;田艳艳;娄豆豆;张熙之;马明;顾宁 | 申请（专利权）人： | 东南大学 |
| 主分类号： | G01N33/543 | 分类号： | G01N33/543;G01N33/574;G01N33/535 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙)32204 | 代理人： | 沈振涛 |
| 地址： | 210009 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供了酶标抗体‑金纳米探针在二氨基联苯胺催化显色及暗场成像中的应用。还提供了一种包括上述酶标抗体‑金纳米探针免疫组化检测试剂盒。本发明将酶标抗体‑金纳米探针催化二氨基联苯胺(DAB)显色，从而可实现协同增强的暗场免疫组化检测，并建立了量化判读。 | ||
| 搜索关键词： | 抗体 纳米 探针 二氨基联苯胺 催化 显色 暗场 成像 应用 | ||
【主权项】：
酶标抗体‑金纳米探针在二氨基联苯胺催化显色及协同增强暗场成像中的应用，用于制备所述酶标抗体‑金纳米探针GNP‑Ab‑HRP的金纳米颗粒的粒径为10‑100nm，每个酶标抗体‑金纳米探针GNP‑Ab‑HRP表面有5‑500酶标抗体，所述酶标抗体‑金纳米探针GNP‑Ab‑HRP采用以下方法制得：选用辣根过氧化物酶HRP标记的兔鼠通用酶标二抗构建酶标抗体‑金纳米探针GNP‑Ab‑HRP，采用静电吸附法将兔鼠通用酶标二抗偶联到金纳米颗粒上，并用1％BSA封闭，离心即得GNP‑Ab‑HRP探针；所述应用的步骤包括：暗场免疫组化检测方法GNP‑Ab‑HRP催化DAB显色，再利用其进行双模态免疫组化检测，并实现量化判读：将待测样品按常规方法预处理后，先与一抗4℃孵育过夜，再与酶标抗体‑金纳米探针GNP‑Ab‑HRP37℃孵育30min，用PBS‑T洗涤后进行DAB显色，在暗场显微镜下观察。
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